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发酵液溶磷含量测定.doc


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文档列表 文档介绍
编号
共 4 页
制订人
制订日期
审核人
审核日期
批准人
批准日期
颁发部门
质量管理部
实施日期
发酵液溶磷含量测定SOP
目的:
制订发酵液溶磷含量测定标准操作规程,确保发酵液中溶磷含量检测的准确。
适用范围:
适用于公司发酵液溶磷含量的检验。
责任者:
质量检验部QC操作人员
四、内容:
1、原理:
正磷酸盐在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷钼酸铵,再用抗坏血酸使之还原成低价的钼蓝,此蓝色溶液符合比尔定律。
2、仪器:电子分析天平分光光度计恒温水浴埚容量瓶刻度吸管
3、磷标准溶液配置
取一定量KH2PO4()置于称量瓶内,在105℃干燥至恒重,,加水溶解,加入1mL硫酸,于100mL容量瓶中定容至刻度,摇匀,即得1mg/mL磷标准溶液。有效期10天。
准确吸取上述磷标准溶液1mL于100mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,即得 10ug/mL磷标准溶液。此标准溶液现配现用。
4、定磷试剂配制:
将下述溶液3mol/L硫酸、水、%钼酸铵、10%抗坏血酸按体积比1∶2∶1∶1的比例混匀即得。现配现用。
5、绘制磷标准曲线
取7支试管,分别按下表加入各试剂,充分摇匀,45℃水浴20分钟,冷却至室温,按照《分光光度计校准使用SOP》在660nm波长下测量其OD值。以溶液磷含量为纵坐标,OD值为横坐标,绘制标准曲线,得到回归方程。
管号
0
1
2
3
4
5
6
10ug/mL磷标准溶液(mL)
0






溶液磷含量(ug)
0
5
10
15
20
25
30
水(mL)






0
定磷试剂(mL)







线性回归系数≥
6、样品磷含量检测
,至试管中, mL水,再加入定磷试剂3mL,振摇,于45℃水浴20分钟,冷却至室温,以空白做对照,按照《分光光度计校准使用SOP》于660波长测OD 值。
5计算:
根据磷标准曲线以及稀释倍数计算磷含量(ug/mL)。
五、文件发放范围
公司生物产业部质量管理部1份,质量检验部2份,产业部相关领导每人1份,存档2份。

六、变更记录:
上版文件编号
上版文件实施日期
本次变更原因、依据及详细变更内容
SL-QAD-248-00

采用新版格式和编号,增加文件修订内容
SLB-QC-010-01

增加了定磷试剂的配制、标定方法、标定记
录,规定了定磷试剂的有效期
磷标准曲线绘制记录
批号: 编号:SLB-QC-010-02R1
磷标准溶液配制:(天平编号: )
℃干燥至恒重的磷酸二氢钾,加水溶解,加入1mL硫酸,
于100mL容量瓶中定容至刻度,摇匀,即得1mg/mL磷标准溶液。有效期10天。
配制人: 配制日期: 年月日
准确吸取上述磷标准溶液1mL于100mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,即得
10ug/mL磷标准溶液。现配现用。
配制

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  • 时间2018-10-10