分子生物学课件.pptx

基因操作(gene manipulation)
基因工程(gene engineering)
遗传工程
gene cloning
molecular cloning
基因操作的核心部分为重组DNA技术。
bination DNA technology
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2
基因工程与建筑工程
生物反应器
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DNA bination
1 定义: 对目的基因进行体外重组,再将重组分子导入受体细胞,使这个基因在受体细胞中复制、转录、翻译表达的过程。
克隆(clone):n,无性繁殖系及其后代。基因完全相同;
v,指从同一祖先产生这类同一的DNA分子群或细胞群的过程。
(Gene, cell,个体)
20世纪70年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
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理论上三大发现:
Avery肺炎双球菌转化实验:
证实了遗传物质的本质是 DNA(1944年)
Watson 和Crick:
提出DNA双螺旋结构模型(1953年)
Nirenberg等:
确定了遗传信息的传递方向(1961-1966年)
DNA RNA 蛋白质
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技术上三大发明:
工具酶:分子手术刀,切割与缝合基因,包括限制性内切核酸酶、连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶等,对DNA或RNA进行各种各样的修饰。
载体(vector, vehicle):本意是媒介体,在基因工程上指能将目的基因导入宿主细胞的DNA分子。
逆转录酶(reverse transcription,RT):打破了中心法则,使真核基因制备成为可能,RT-PCR。
RNA DNA
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gene manipulation 过程
1、目的基因的获取(PCR,gene library);
2、载体(vector)的选择与构建(工具酶等);
3、目的基因与载体连接,构建重组DNA分子;
4、重组DNA导入受体细胞,转化子筛选;
5、受体细胞中目的基因的功能表达。
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基因工程的基本过程
分(合成)、切、连、转、选、鉴
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重组DNA技术的意义
打破了自然种的界限
真核/原核生物间基因的交流
对生物进行定向改造
基因治疗(基因矫正/添加,RNAi)
基因工程药物(生长激素,细胞生长因子,重组疫苗等)
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9
组织纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)
One example---
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How
?
载体,
工具酶
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