高效液相色谱-检测器.ppt

高效液相色谱
检测器
侯建军
检测器是高效液相色谱仪的核心部件,他负责把从色谱柱分离出来的各组分快速、准确的检测出来,实现定性、定量分析。
检测器的分类
1、紫外可见吸收检测器(UV)
2 、光电二极管阵列检测器( PDA)
3 、荧光检测器( FD)
4 、示差折光检测器( RID)
5 、电化学检测器( ED)
6 、化学发光检测器( CD)
7 、蒸发光散射检测器(ELSD)
紫外可见吸收检测器
(ultraviolet-visible detector,UV)
紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的
检测器,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
属于选择性检测器。
1 、特点:灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,波长可选,对流动相的流速和温度变化不敏感,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达10-9g/ml以下,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与多种检测器串联使用。工作原理与结构同一般分光光度计相似,也就是装有流通池的紫外可见分光光度计。
2、结构与原理:紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm~800nm)。
它有两个流通池,一个参比池,一个测量池。光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,即无信号输出。当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,即有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
可变波长紫外检测器
固定波长紫外检测器
结构图
紫外/可见光检测器的光路系统,由氘灯提供190nm~600nm宽带光谱,光线径直射到全息凹面光栅上,衍射的单色光射到半透射反光镜,被分成两束光线,一束经流通池后照射到测量光电池上,另一束经参比池照射到参比光电池上,光电池把光能量转换成微小电流信号,光栅由一台微机控制的步进电机精确地驱动以改变波长。如图所示:
D
氘灯
光门
波
长
调
节
杆
凹面光栅
半透镜
流通池
光电池(测量)
光电池(参比)
暗盒
单
色
器
光源
步进电机
半透反光镜
检测池
参比池
光/电转换
前置放大器
A/D
CPU
时钟
并行口
讯号输出
(积分/记录)
键盘
显示屏
直流
电源
变压器
交流电源
冷却风机
《紫外/可见光检测器系统原理图》
3、局限:对紫外吸收差的化合物如不含不饱和键的烃类等灵敏度很低。
流动相的选择受到一定限制,紫外吸收大的溶剂不能做流动相。每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,流动相的截止波长不能大于紫外吸收检测器的工作波长。
光电二极管阵列检测器
(photodiode array detector, PDA )
光电二极管阵列检测器是紫外检测器的重要进展,也称快速扫描紫外检测器,在液相色谱分析中得到大量的使用,被认为是液相色谱最有发展、最好的检测器。
1、特点: 灵敏度比紫外检测器高,噪音低,线性范围宽,对流速和温度的波动不灵敏,适用于梯度洗脱及制备色谱。