毕业论文（设计）-金黄色葡萄球菌及其肠毒素快速检测技术的研究.pdf

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摘要
本文以快速、简便、准确地检出食品中金黄色葡萄球菌及其肠毒素为
目的,进行了金黄色葡萄球菌和葡萄球菌肠毒素检测方法的研究。
采用纸片法检测食品中金黄色葡萄球菌的结果与国标法基本一致,
而前者具有更高的灵敏度。纸片法的检测周期为欤攴ㄎ天。
证明纸片法更简便实用。
采用反向乳胶凝集法、偷鞍仔酒
检测食品中的葡萄球菌肠毒素,结果显示:法的检出率较高%
但所需检测时间较长;法快速、简便,但检出率较低畂%也
能分型检测葡萄球菌肠毒素。相比之下,蛋白芯片法具有高检出率%
高通量、多元化、快速准确的特点,明显优于和。
论文又对蛋白芯片法的检测条件进行了优化,结果显示适宜的检测条
件为:兔抗固定液浓度为/,兔抗和兔抗
固定液浓度均为/;抗体固定时问为环獗帐奔湮.;抗
体缓冲液为的磷酸盐缓冲液;封闭液中加入サ恼崽牵豢乖固宸
应时间为。
采用优化后蛋白芯片法测定不同种类的葡萄球菌肠毒素—
和峁鸖和募觳庀尬./,募觳庀尬
/。募斐雎饰%,%,甇%。证明
了蛋白芯片法的快速、方便和高效性。
关键词:葡萄球菌;金黄色葡萄球菌;葡萄球菌肠毒素;纸片法;法;
反向乳胶凝集试验;—ǎ坏鞍仔酒
沈阳农业大学博士学位论文
第一章文献综述
一、生物毒素的研究现状
生物毒素是一大类生物活性物质的总称,主要包括真菌毒素、海洋毒素、
细菌毒素等录绞ぃ。生物毒素对食品安全和人类健康构成了严重的
威胁,因此,对进出口食品进行生物毒素的检测分析是非常必要和迫切的。
真菌毒素
真菌毒素是某些丝状真菌产生的具有生物毒性的次级代谢
产物,这些毒性真菌包括曲霉、青霉、镰刀霉、链格孢霉、棒孢霉和毛壳菌
等。.,颓
霉酸,其他真菌毒素也相继于二十世纪三十年代和四十年代得以分离纯化,
然而,对真菌毒素的真正研究却是从年黄曲霉毒素的发现开始的。
许多重要的真菌毒素都有同时影响几个器官的致癌性,它们还可使这些
影响进一步发展,导致生育缺陷及影响免疫系统,有的还具有激素作用或神
经毒性,除对这些不同的器官—位点特殊作用外,还观察到有干扰肠胃系统、
刺激皮肤及血液病学钊何埃跎芷剑的影响。真菌毒素具有两种毒
性,一是致鹕耍现卣呖芍掳窍赴拘裕衅苹抵誓ず拖赴
的作用,但不同毒素各有不同。文献报告罱ú,一些疾病可能与
真菌毒素有关,如肝癌、地方性肾病、食物中毒白细胞缺乏病⑹
道癌、克山病、大骨节病、趴病等。
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黄曲霉毒素是真菌毒素,实际上是指一组化学组成相似的毒素,黄曲霉
和寄生曲霉是产生黄曲霉毒素的主要菌种,其他曲霉、毛霉、青霉、镰孢霉、
根霉等也可产生黄曲霉毒素,黄曲霉毒素最常见于花生及花生制品,玉米、
棉籽、一些坚果类食品和饲料中,主要有黄曲霉毒素、、及等
多种甐.,渲幸曰魄苟舅谺嬖诹孔畲螅沧罹叨拘裕
黄曲霉毒索为黄曲霉毒素的代谢物,毒性仅次于黄曲霉毒素,常存在
于牛奶和奶制品中。
黄曲霉毒素是已被证实的致癌物,其中黄曲霉毒素、是强致癌物。
黄曲霉毒素作用机理是影响细胞膜,抑制铣刹⒏扇拍承┟傅母杏Ψ绞剑
中毒症状无特异表现,按症状的严重程度不同,临床可表现为发育迟缓、腹
泻、肝肿大、肝出血、肝硬化、肝坏死、脂肪渗透、胆道增生等。
黄曲霉毒素是细胞毒素,也是致癌物质,饲料中含量达到痥纯
引起大鼠合成障碍。
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桔霉素是年从桔青霉中首次获得的,是某些青霉和曲霉的代谢物,
科学家在澳洲的一种草本植物里也发现了桔霉素
琑.。桔霉素主要危害肾,然而毒性相对较小。其毒性来
自的作用,其结构类似线粒体酶的活性部位且竞争与
底物的结合。实验证明,桔霉素可抑制大鼠肝细胞福晁嵬亚饷负
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比黄曲霉毒素更频繁地出现在被曲霉菌污染的花生上。有人从食品和饲料中
分离出大量青霉菌,从中鉴定出数十种真菌毒素,而其中最多的就是
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麦角生物碱是人们最先认识到的一类真菌毒素,麦角化合物可大致分成
类,现在已知包括有嘀只衔铮渲凶罹呱砘钚缘木褪锹蠼巧
碱,可按麦角酸衍生物和其异构体分类。面粉和焙烤食品中都可能存有麦角
生物碱,然而,现在更引起关注的是作饲料用途的谷类中可能存在的麦角生
物碱。
麦角生物碱具有收缩血管和肌肉纤维的作用,也可能会影响中枢神经系
统的功用,如有些麦角生物碱已经被用于治疗帕金森氏病。麦角中毒表现为
瘙痒、麻木、肌肉痉挛等,现在由食物或饲料引起的麦角中毒很罕见了,麦
角中毒主要是麦角药物服用过量引起的