薄层板,跑版注意事项.docx

薄层色谱法 --- 跑板
1. 点样
用微量进样器进行点样。点样前,先用铅笔在层析上距末端 2cm 处轻轻画一横线,然后用毛细管
吸取样液在横线上轻轻点样,点的斑点较小,展开的色谱图分离度好,颜色分明。如果要重新点样,一
定要等前一次点样残余的溶剂挥发后再点样( 用电吹风的热风吹干再点 ),以免点样斑点过大。一般斑
点直径大于 2mm,不宜超过 5mm。点好样的薄层板用电吹风的热风吹干。底线距基线 1~,点
间距离为 lcm 左右 ,样点与玻璃边缘距离至少 lcm,为防止边缘效应 ,

将点了样的薄层板放在盛在有展开剂的展开槽中,由于毛细管作用,展开溶剂在薄层板上缓慢前
进,前进至一定距离后,取出薄层板,样品组分固移动速度不同而彼此分离。
① 展开室应预饱和。为达到饱和效果,可在室中加入足够量的展开剂,密封室顶的盖。
② 展开剂一般为两种以上互溶的有机溶剂,并且临用时新配为宜。强烈振摇使混合液充分混匀,放置,
如果分层,取用体积大的一层作为展开剂。绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸,振摇展开缸来配
制展开剂。 混合不均匀和没有分液的展开剂,会造成层析的完全失败。 各组成溶剂的比例准确度对
不同的分析任务有不同的要求,尽量达到实验室仪器的最高精确度,比如:取 1ml 的溶剂,应使用
1ml 的单标移液管,
③ 薄层板点样后,应待溶剂挥发完,再放人展开室中展开。
④ 展开应密闭, 展距一般为 8~ 15cm。薄层板放入展开室时,展开剂不能没过样点。一般情况下, 展
开剂浸入薄层下端的高度不宜超过 。
⑤ 展开剂 每次展开后,都需要更换, 不能重复使用 。(展开缸中得展开剂弃去,密封在容量瓶中得展开
剂可在当天使用)
⑥ 展开后的薄层板用适当的方法, 使溶剂挥发完全 ,然后进行检视。
⑦ Rf 值一般控制在 ~,当 Rf 值很大或很小时,应适当改变流动相的比例。
3. 斑点的检出
展开后的薄层板经过干燥后,常用紫外光灯照射或用显色剂显色检出斑点。对于无色组分,在用显色
剂时, 显色剂喷洒要均匀,量要适度 。紫外光灯的功率越大,暗室越暗,检出效果就越好。
展开分离后,化合物在薄层板上的位置用比移值 (Rf 值 )来表示。 化合物斑点中心至原点的距离与溶剂
前沿至原点的距离的比值就是该化合物的 Rf 值。
注意事项:
 2 部分 :
1、展开缸的预饱和:在展开之前,使展开剂蒸汽在展开缸内饱和,使展开缸汽液状态达到一定的稳定
状态,此时尚未放薄层板。
2、薄层板的预饱和:在展开缸饱和后,放入已经点样完毕的薄层板,进行饱和,使薄层板整体差异性
减小。 具体做法是 :在双槽层析玻璃缸内 ,将其中一个槽内倒入配好的展开剂 ,另一个槽内放入薄层板 ,盖
好上面的玻璃盖 ,这时候就是在预饱和。
关于饱和时间:根据展开剂而定。
1、展开剂组分极性差异不大的且挥发性好的,时间可以短一些,一般 15- 20 分钟即可;
2、极性差异大的,且挥发性差异大的,时间要长一些,一般要 30- 60 分钟;
3、极性差异大的,且挥发性差异不大的,时间要长一些,一般要 20 -30 分钟;
4、极性差异不大,且挥发性差不大的,时间可以短一些,一般要 10 -15