医学免疫学实验.pdf

免疫学实验免疫学实验免疫学实验
九九江学江学院院医学院医学院
免免疫学疫学教教研室研室
吴吴建芳建芳
MMEENUNU
n 中中性粒性粒细细胞的吞胞的吞噬噬作用作用
n 凝凝集反应集反应
直接凝集间接凝集间接凝集抑制
n 沉沉淀反应淀反应
n 外外周血周血单单个核细个核细胞胞的分离的分离
n 免免疫系疫系统统组分的组分的分分离及离及活活性检测性检测
小鼠胸腺、脾摘除小鼠淋巴细胞分离及活性检测
n 免免疫酶疫酶技术技术
ELISA夹心法检测HBsAg
ELISA竞争法检测抗-HBc
中性粒细胞的吞噬作用中性粒细胞的吞噬作用
【【实验目的实验目的】】

的原理和方法。的原理和方法。

特异性免疫机制。特异性免疫机制。
【【实验原理实验原理】】
中性粒细胞具有吞噬杀菌功中性粒细胞具有吞噬杀菌功
能,当与颗粒性物质(如葡萄球能,当与颗粒性物质(如葡萄球
菌等)混合孵育一定时间后,颗菌等)混合孵育一定时间后,颗
粒性物质被吞噬杀灭,根据吞噬粒性物质被吞噬杀灭,根据吞噬
率、吞噬指数可反映该细胞的吞率、吞噬指数可反映该细胞的吞
噬功能。噬功能。
【【实验材料实验材料】】
(白皮(白色色)葡)葡萄萄球菌菌球菌菌液液(浓度(浓度
66~1010亿亿//ml)ml)。。
(素溶液(2255U/U/mlml););甲甲醇醇,碱性,碱性
美美蓝(蓝(或或瑞氏)瑞氏)染染液。液。
,,凹凹玻片玻片,,载载玻片玻片,,
采采血针血针,,微量加微量加样器样器,,湿盒湿盒,,显显微镜微镜,,恒恒
温温培养箱培养箱,,75%75%酒精酒精,,棉签棉签,,香柏油香柏油,,二二甲甲
苯苯等。等。
【【实验方法实验方法】】
1、用微量加样器,吸取肝素20ul加入洁净凹玻片
凹孔内。
2、用酒精棉签消毒手指后,刺破皮肤,以血红蛋
白吸管取血40ul,立即放入盛有肝素的凹玻片凹孔内,
并充分混匀。
3、用微量加样器取葡萄球菌菌液20ul加入上述凹
玻片凹孔内,充分混匀。
4、将凹玻片置于湿盒内,30℃温箱中30min,其间
每隔10min摇匀一次。
5、取一小滴上述混合液,置于载玻片上,用另一
载玻片推成薄血片,待干。
6、滴加甲醇固定3min,水洗。
7、加碱性美蓝染色1~2min,水洗,印干。
8、置油镜下观察吞噬和未吞噬的白细胞并计数。
【实验实验结果结果】
吞噬细菌的中性粒细胞数
吞噬百分率= ×100%
观察记录的吞噬细胞总数
被吞噬的细菌总数
吞噬指数=
观察记录的吞噬细胞总数
【【实验实验思考思考】】
11、、在在吞吞噬细噬细胞中胞中发现发现细菌时,细菌时,
如如何区别何区别吞噬的吞噬的细细菌和菌和粘粘附附在在吞噬吞噬
细细胞表胞表面面的细菌的细菌??
22、、简简述述机体机体非非特异特异性性免疫的免疫的概概
念及念及特特点点。。
凝集凝集反反应应
【【实验目的实验目的】】
、理、基基本本类型及类型及其其
临临床意义床意义。。
、间、间接接凝集凝集实实验的验的
实实验方验方法和法和结果分结果分析析。。
概概述述
在在一一定浓度的定浓度的电电解解质质溶液中溶液中,,颗粒性颗粒性抗抗
原与原与相相应抗应抗体体结结合合后,后,出出现现肉眼肉眼可可见见的的凝集凝集
块块,,称称为为凝集凝集反反应应。。凝集凝集反反应是应是一一种种定定性的性的
检测检测方方法,法,也也可可以以进行半进行半定定量量检测检测。。凝集凝集反反
应应可可分分为为直接凝集直接凝集反反应应和间和间接凝集接凝集反反应应。。由由
于于凝集凝集反反应应方法方法简便简便,目,目前前在在临临床检床检验中验中仍仍
被被广泛应广泛应用用。。