多发性骨髓瘤护理.ppt

《大鼠脊髓损伤后细胞自噬的表达及作用的实验研究》脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)是一种以损伤平面以下感觉、运动、括约肌功能完全或不完全丧失为主要临床表现的中枢神经统的严重创伤。随着交通运输的高速化、体育运动的极限化及暴力伤害的出现,现代化SCI呈现出高发生率、高致残率、高耗费、低死亡和患者主要为青壮年等特点。自噬是细胞内的物质成分利用溶酶体被降解过程的统称,它是真核细胞所特有的。细胞通过单层或双层膜包裹待降解物形成自噬体,然后运送到溶酶体形成自噬溶酶体并进行多种酶的消化及降解,以实现细胞本身的代谢和某些细胞器的更新。而细胞对这种合成与降解的精细调节,对维持细胞的自身稳态有重要意义。一、常见的实验性脊髓损伤动物模型:ALLen首次设计了脊髓背侧打击模型,利用不同重量的重锤从不同的高度沿一套管垂直落下打击脊髓背侧造成不同程度的损伤,随后FalconerHiruma、Iwanami、Yeo等又在此基础上,根据脊髓损伤的病理生理特点,朝着更加精确、可控制、可重复及可定量的方向发展,从而提高了不同实验的可比性。虽然该模型在研究脊髓损伤后神经元、神经胶质细胞的病理变化、再生规律和相互作用、探索神经保护策略等有较大帮助,但在模拟人类急性SCI方面仍存在较多弊端,如同样的势能造成的损伤往往程度相差很大,且由于在打击瞬间的不稳定及侧向偏移导致重复性差,重物打击法仅模拟了致伤时的最初打击状态,忽略了持续性的挤压作用。:利用压迫物造成脊髓组织变形及结构改变。Tarlov等于1953年用一小气囊连接导气管置于椎管内,然后向气囊内充气造成脊髓压迫损伤。:使用锐利的虹膜刀片或显微剪全横断或半横断脊髓,或切除一段脊髓,使损伤部位的头端和尾端失去解剖连续性及生理上的联系。该法最大的特点是可以为神经轴突的再生提供有价值的资料。:Rivin等于1978年使用改装的动脉瘤夹,直接钳夹脊髓,可以反映不同钳夹力、不同的压迫时间与脊髓损伤程度的关系。Fehlings等通过调整不同钳夹力量(从2g-98g)发现钳夹力越大,损伤区域残存的轴突越少,功能恢复越不理想。李刚等用动脉瘤夹建立模型,造成接近于日常生活中人体脊髓损伤的类型。在研究脊髓损伤后急性期的病理生理变化、解除钳夹压迫的时机及电刺激和神经保护性干预等方面具有重要作用。制作该模型的关键是钳夹的部位与压力大小的确定。由于钳夹型(动脉血管夹)更加能保持脊髓损伤保持硬脊膜的完整性,且损伤后的解剖结构与神经功能的变化与挫伤型脊髓损伤非常相似。造成压迫损伤的程度主要取决于压力的大小和受压的时间长短,脊髓受压后使血流供给障碍而造成组织缺血缺氧,加之机械压迫的原发作用而致脊髓组织变性坏死。此类模型多为闭合性损伤,但为非瞬间损伤,便于进行神经功能和代谢改变的检测。二、:①相似性:实验动物生物学特性是否接近人类;②差异性与可获性:最理想的实验动物最理想的实验动物是灵长类动物(如猿、猩猩、猴等),这类动物体型大,在手术操作实感上接近人类,但其价格昂贵,难以获得并推广。目前国内实验研究最常选用的动物是大白鼠、兔、猫和犬。这些动物高级神经系统较发达,且价格便宜,最易获得。对近10年关于脊髓损伤的96个实验研究项目进行统计分析表明,选用大白鼠,有54项,占56%,其余依次为兔(20%),猫(%)、本研究中所选用SD大鼠封闭群动物遗传背景清楚,便于饲养,与猫、犬等大型实验动物比较它们具有容易获得、种系内纯合性好、生理较为接近人类,且个体小,便于操作,具有较强的抗感染能力和生命力,便于管理。清洁级的饲养条件也保证了本研究的顺利进行。250-300g的大鼠体积也适中,与小鼠比较,手术操作也比较方便,实验结束后取得的损伤段脊髓也足够用于做组织学观察及RT-PCR、Westernblot等分子生物学分析,因此,本次实验中实验动物选择SD大鼠,体重250-300g。