总体计算过程常规样本测试:AD->吸光度->反应度->浓度定标样本测试:AD->吸光度->反应度->定标参数质控样本测试:AD->吸光度->反应度->质控结果AD->吸光度目的: 对某个测试每周期采集的AD值,先计算该周期采集点的吸光度,本计算过程是后续反应度计算的基础公式: Abs=(log10AD本底AD读数)/ Abs: 该测试在某周期的吸光度 AD本底: 该测试所用反应杯的空白AD,在大生化上,是使用初始化后或进行专门的水空白测试后,该测试所用反应杯所读到的水空白AD,在小生化上,是该测试所用反应杯在第三阶清洗后读到的水空白AD AD读数:该测试在某周期读到的AD值 : 光径系数,标准光径为10mm,,。吸光度->反应度目的: 依据某测试在反应时间段内读到的每周期吸光度,计算该测试最终反应度,本计算过程是后续浓度或定标参数计算的基础。 依据分析方法不同,对应的计算方法也不同终点法 R=R0-K*R空白其中: R:终点法测试的最终反应度 R0:原始反应度 K:体积修正因子 R空白:终点法测试反应度空白 下面进一步说明每个计算参数的各自的计算公式:原始吸光度:R0 取反应周期最后若干个采集点点,如果:反应周期采集点不少于4个点,则取最后4点,去掉最大最小值,取中间2点计算平均值;如果只有3点,则去掉最大最小取中间值;如果只有2点,取2点的平均值;如果只有1点,取该点的值; 反应周期开始及结束时间参见“附录一:反应时间段”。空白吸光度:R空白 取空白时间段最后若干个点,如果:空白时间段内采集点不少于4个点,则取最后4点,去掉最大最小值,取中间2点计算平均值;如果只有3点,则去掉最大最小取中间值;如果只有2点,取2点的平均值;如果只有1点,取该点的值; 空白时间段开始及结束时间参见“附录二:空白时间段”。体积修正因子:K 单试剂项目:K=R1/(R1+S) 双试剂项目:K=(R1+S)/(R1+S+R2) 上述的R1,S,R2分别指该项目第一试剂加样量,样本加样量,第二试剂加样量 两点法/固定时间法 R=(A2-A1)/(T2-T1)其中: R:两点法测试的最终反应度 A2:反应结束点的吸光度 A1:反应结束点的吸光度 T2:反应结束点的时间,单位为分钟 T1:反应结束点的时间,单位为分钟 反应周期开始及结束时间参见“附录一:反应时间段”。 速率法/动力学法R=N*i=1NTiAi-i=1N
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