2003年湖南省自然科学基金申请书NGU泌尿生殖道hBD-2基因表达、诱导及丹参酮对其的影响.doc

项目类别申报学科代码项目编号AC030504湖南省自然科学基金申请书(表一)项目名称:NGU泌尿生殖道hBD-2基因表达、诱导及丹参***对其的影响申请者:所在单位:湖南中医学院邮政编码:410007通讯地址:长沙市韶山中路119号E-mail:电话:传真:申请日期:2003年5月8日湖南省自然科学基金委员会二〇〇三年制项目类别申报学科代码项目编号AC030504湖南省自然科学基金申请书(表二)项目名称:NGU泌尿生殖道hBD-2基因表达、诱导及丹参***对其的影响湖南省自然科学基金委员会二OO三年制注意:湖南省自然科学基金申请书(表二)所填写全部内容不得出现申请者及项目组成员的姓名和工作单位,否则,将视为形式审查不合格。项目研究内容和意义简介(限400字)运用免疫学和分子生物学技术研究hBD-2基因在泌尿生殖道粘膜上皮的表达,hBD-2肽在非淋(支原体)感染中的作用和对支原体的杀灭活性与作用机制,以及丹参***对hBD-2基因表达的影响。从而为非淋开创新的治疗方法提供基础,以更有效的治疗非淋球菌性尿道炎(宫颈炎);并研究中医药对细胞基因及蛋白产物表达水平的调节作用,从较深层次探讨中医药作用机理。一、立论依据(包括项目的研究意义、国内外研究现状分析,并附主要参考文献及出处,可加附页)对基础研究,着重结合学科发展趋势,论述项目的科学意义;对应用基础研究,着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题,论述其应用前景。(可加附页)人体防御素[1、2]是近年来发现的一类小分子内源性抗微生物多肽,可分为α和β防御素,不同的防御素各有其抗病原微生物的特点;而人体β防御素-2(hBD-2)发现有广谱高效抗G—、G+菌、真菌、某些衣壳病毒、支原体的活性,且未见有耐药性。其作用机制主要是通过干扰和破坏微生物胞膜而起抑制或杀伤作用;是天然免疫的重要介质,并与获得性免疫有较密切关系[3]。防御素在泌尿生殖系统的研究成果,为治疗生殖系统的疑难病、多发病提供了全新的思路和手段。但目前学者多倾向于研究防御素在不同部位的表达及影响因素[4]。应用研究,尤其是应用天然药物诱导其表达,暂未见报导。现已证实[5]内分泌(如雌激素)和前炎症因子可调控HD-5(一种α防御素)在***、子宫颈、子宫、输卵管的表达;最近又发现α防御素(HNP1-3)在患有感染性盆腔疾病(PID,由淋球菌、***毛滴虫、沙眼衣原体引起)妇女的表达水平较无PID妇女中度升高,且强度与子宫内膜炎病情密切相关[6]。但对β防御素,特别是对可诱导表达的人体β防御素-2(hBD-2)是否亦有类似作用有待进一步实验证实。非淋菌性尿道炎(宫颈炎)为当前最为常见的性传播疾病之一,主要由衣原体和支原体引起,可致不育、不孕,给患者造成极大的痛苦。在西方国家,居性传播疾病的首位,我国2000年为253116例,占性病首位[7]。目前对非淋菌性尿道炎(宫颈炎)的治疗仍以西药抗生素(如注射用阿奇霉素[8]、克拉霉素、罗红霉素、氧***沙星)为主,有一定疗效,但却有一定的副作用。注射用阿奇霉素可引起腹痛、恶心、呕吐、眩晕,注射部位红肿热痛等副作用;氧***沙星有肝肾损害,对中枢神经系统及罹患孕妇胎儿的骨发育都产生不良影响;红霉素也存在胃肠道反应,使患者难以耐受。不规则治疗,反复感染和慢性迁延等因素,使得耐药菌株日益增多,交叉耐药和多种耐药明显增多[9],有研究表明[10]%发生耐药,%,%。%。给临床治疗带来了极大困难。祖国医学认为“正气存内,邪不可干”;将抗御外邪入侵的正气称为“卫气”。《素问》:“卫者,水谷之悍气也,其气忄票疾滑利,不能入于脉内,故循皮肤之中,分肉之间,熏于肓膜,散于胸腹,逆其气则病,从其气则愈”。说明卫气是防御功能的主要成分,不仅能在体表起着屏障作用,亦可在机体内部与病邪斗争,发挥免疫作用。防御素生物学特点及分布规律与其有相似之处,值得注意的是:没有肺部感染征象的系统感染,支气管分泌物中hBD-2亦有升高[11],而在抗生素治疗后hBD-2有戏剧性下降,与肺主气似有一定联系[12],为我们从中医正气入手研究防御素治疗非淋菌性尿道炎(宫颈炎)提供了可贵的思路。非淋菌性尿道炎(宫颈炎)多缠绵难愈,结合病征,临床实践,与其本“久病多虚,久病多瘀”有关。“气为血帅,血为气母”,血虚则无以载气,气亦随之而少;血瘀不去而新血不生,则又致血虚。气主固护肌表,防御外邪的入侵,气虚则外邪易于侵袭,不能鼓邪外出,病则迁延难愈。“一味丹参,功同四物”,丹参既可活血祛瘀,又可补血资气。丹参***[13]是从中药丹参中提取的脂溶性有效成分,主要成分是隐丹参***,具有明确的抗菌、消炎和微弱的雌性激素样活性,临床应用较广。皮肤病、妇科、心血管内科、抗肿瘤方面都取