基因芯片技术检测性传播生殖器溃疡性疾病病原体的研究-皮肤病与性病学专业论文.docx

中国协和医科大学博士学位论文缩略语lGUD genitalulcerdisease,***溃疡性疾病NCBI NationalCenterforBiotechnologyInternation美国生物信息中心EMBL EuropeanMolecuLarBiologyLaboratory欧洲分子生物学实验室GenBank icsequencedatabank,核酸序列数据库DDJB DNADatabankofJapan,日本核酸数据库BLAST basiclocalalignmentsearchtool一种局部对位排列搜索工具SNP Singlenucleotidepolymorphism单核苷酸多态性CT Chlamydiatrachomatis,沙眼衣原体HSVI herpesSimplexvirustype1单纯疱疹病毒I型HSV2 herpessimplexvirustype2单纯疱疹病毒II型HD Haemophilusducreyi,杜克雷嗜血杆菌Pct probeofherpesSimplexvirus1单纯疱疹病毒I型特异性探针Phsv2 probeofherpessimplexvirus2单纯疱疹病毒II型特异性探针Ptp probeofTreponemapallidum梅毒螺旋体特异性探针Phd probeofHaemophilusducreyi杜克雷嗜血杆菌特异性探针PCR polymerasechainreaction,聚合酶链式反应kD kilodalton,千道尔顿M-PCR MultiplexPCR,复合聚合酶链式反应EB etidiumbromide,溴乙锭EDTA etraaceticacid乙二***四乙酸bp basepa±'r,碱基对mln minute,分钟0D opticaldensity,光密度Ep Eppendorf,plementarydeoxyribonucleicacid,互{}hDNASDS sodiumdodecylsulfate, sodiumchloride/sodiumCitrate***化钠/柠檬酸钠(缓冲液)SSPE sodiumchloride/***化钠/磷酸二氢钠/7_,-***四乙酸(缓冲液)PBSphosphatebuffersolution,DChargeCoupleDevice,非共聚焦检测装置PMT PhotomulitiplierTubes,激光共聚焦检测装置h hour, second,秒NS normalsaline,生理盐水BSA bovineserumalbumin,牛血清白蛋白CPE cytopathiceffect,细胞病变GH genitalherpes,***疱疹STD sexuallytransmitteddiseases,***溃疡性疾病病原体的研究前言目前,全世界***溃疡性疾病(GUD)每年发病病例数可能超过2000万。1991—2000年间我国31个省、自治区、直辖市性病疫情报告流行病学资料显示:%,***%,1991年报告的软下疳和性病性淋巴肉芽肿分别只有83例和10例,至2000年两种疾病分别增加至1047例和505例”3。由于GUD与HIV的感染和传播密切相关,正确诊治GUD是预防和控制HIV感染的重要环节,已引起人们的重视n_。i”·“。现已证实***溃疡最常见的病原体为梅毒螺旋体、单纯疱疹病毒(HSVl、HSV2)、杜克雷嗜血杆菌及沙眼衣原体L。,L:,L。型,由于多重感染或混和感染常见,故其病因复杂。传统的病因学实验室诊断方法大多耗时长、敏感性低及操作技术要求高“’”1。诊断HSV感染,有各种不同的实验室方法,包括:(1)组织培养法分离培养HSV;(2)细胞学检查法;(3)抗原检查法;(4)血清抗体检测法。实验室诊断的“金标准”仍是HSV分离培养法,通过抗体中和试验、DNA杂交试验、酶免疫试验、免疫荧光试验等方法对培养结果作鉴定及HSV分型。这种传统的病原学检测方法敏感性欠佳,尤其是对无症状病毒排放、早期皮损及结痂性皮损中的HSV检出的敏感性差,费时费力而且设备和技术条件要求高 3。细胞学检查敏感性为40%一60%,而且特异性差,疱疹病毒科的其他病毒,如水痘一带状疱疹病毒感染,中国协和医科大学博士学位论文也.-j-出现