高效液相色谱的使用及氨基酸标样的分析.pptx

高效液相色谱的使用及氨基酸标样的分析高效液相色谱的使用及氨基酸标样的分析一、高效液相色谱的基础知识二、LC-10AVP液相色谱仪键盘操作三、氨基酸标样的分析一、高效液相色谱的基础知识高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)以前也称为高压(highpressure)液相色谱法、高速(highspeed)液相色谱法。HPLC是在经典的液相色谱法的基础上,在20世纪70年代后快速发展起来的一项高效、快速的分离分析技术。它是以经典的液相色谱为基础,以高压下的液体为流动相的色谱过程,具有高压、高效、高速和高灵敏度的特点。广泛应用于医药、生化、石油、化工、环境卫生和食品等领域。液相色谱:以液体作为流动相的色谱分离方法适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用气相色谱:以气体作为流动相的色谱分离方法适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物的分析流动相只起运载样品分子的能力一、色谱的起源二、定义色谱法:利用组分在两相之间分配系数不同而进行分离的技术移动相:携带样品流过整个系统的流体固定相:静止不动的一相,通常为色谱柱固定液反相液相色谱流动相极性大于固定相极性能溶于水/有机混合物的中性或非离子化合物正相液相色谱流动相极性小于固定相极性不溶于水/有机混合液的亲脂样品、异构体混合物和制备HPLC三、流动相的选择采用“HPLC”级溶剂避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂对试样有适宜的溶解度溶剂粘度要小与检测器相匹配四、高效液相色谱仪的基本结构高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统等五大部分组成,其基本结构如下图:、LC-10AVP液相色谱仪键盘操作