下载此文档

分子生物学实验二.ppt

文档分类：高等教育 | 页数：约9页举报非法文档有奖

1/9

下载提示

1.该资料是网友上传的，本站提供全文预览，预览什么样，下载就什么样。
2.下载该文档所得收入归上传者、原创者。
3.下载的文档，不会出现我们的网址水印。

同意并开始全文预览

(约 1-6 秒)

1/9 下载此文档

文档列表 文档介绍

分子生物学实验实验二植物组织DNA的提取一、实验原理首先,必须破碎细胞壁释放出细胞内容物。分离总基因组DNA常用的破壁方法是将新鲜植物组织在液氮中快速冷冻后,用研钵将其磨成粉末。其次,必须破坏细胞膜使DNA释放到提取缓冲液中。最后,一旦DNA释放出来,其剪切破坏的程度必须要降到最低。剧烈振荡会打断溶液中相对分子质量高的DNA。二、材料与设备天平、研钵、离心管、65℃水浴、台式离心机(转速至少可达12000rpm)三、试剂与配制液氮提取液TPS:100mMTris-HCl()10mMEDTA()1MKCl***仿(三***甲烷)异丙醇70%乙醇TE():10mMTris-HCl()1mMEDTA()四、实验步骤1、用液氮将叶片研碎;研磨2、,65℃水浴20min;消化3、13000rpm,5min;4、450ul上清,加等体积***仿,混匀,12000rpm,离心5min;5、400ul上清,加等体积异丙醇,混匀,静置10min;抽提6、12000rpm,10min;沉淀7、弃上清。加500ul70%乙醇,3500rpm,5min,弃上清;洗涤8、加30ulTE溶解。五、思考题1、植物组织DNA的提取最难解决的问题是什么?2、植物组织DNA提取时应当在那些步骤要非常注意?微量移液器使用对应的吸头(枪头)、确认样品的加入。台式离心机水浴锅

分子生物学实验二来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.