不同样品核酸提取、扩增、荧光定量PCR完美解决方案不同样品核酸提取、扩增、荧光定量PCR完美解决方案---核酸提取攻略北京百泰克生物技术有限公司(北京市海淀区上地信息路15号)不同样品RNA提取最适方法RNA纯度与质量考察RNA提取常见问题及解决方案常见样品DNA提取特殊样品DNA提取DNA分离纯化中常见问题分析内容概要样品裂解液上层溶液液氮研磨或其他方法处理抽提细胞裂解干燥溶解或洗脱离心洗涤酒精沉淀或介质吸附RNA提取流程沉淀法:异丙醇或乙醇介质吸附法:RNA提取常用方法---沉淀方法吸附材料原理硅基质高盐低pH值结合核酸,低盐高pH值洗脱阴离子交换树脂低盐高pH值结合核酸,高盐低pH值洗脱磁珠磁性微粒挂上不同基团可吸附并携带RNA异硫***酸胍/苯酚法在变性剂异硫***酸胍的作用下,细胞被裂解,同时核蛋白体上的蛋白变性,核酸释放;释放出来的DNA和RNA由于在特定pH下溶解度的不同而分别位于整个体系中的中间相和水相,从而得以分离;有机溶剂抽提,沉淀,得到纯净RNA。RNA提取常用方法---裂解方式胍盐/β-巯基乙醇盐酸胍裂解样本,抑制RNase的活性;β-巯基乙醇变性蛋白BioTeke的RNA提取试剂具有明显的优势在经典试剂的基础上,不断升级。多款高品质的RNA提取试剂:Tripure(Trizol)RNApure(Trizol法的升级产品)组织/细胞样品RNA提取材料:小鼠肝脏组织方法::图:小鼠肝脏组织RNA1234RNApure高纯总RNA快速提取试剂123图片说明:1BioTekeRNAclean2BioTekeTRIpure(TRIzol法)3BioTekeRNApure离心柱型(注:本图实验材料为植物叶片)同一样品基因组DNA和RNA分提原理:根据基因组DNA和RNA在硅基质膜上的结合条件不同,用两根离心吸附柱分别提取基因组DNA和RNA。
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