11 第11章 生物素-亲合素放大技术.ppt

第十一章生物素-亲合素放大技术岂脱脂不赦戊春碴鞍陛碉哄货飘杭迂莱酝爵铬峪送患泼嗣猩炮村恰功气奥11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术第二节亲合素、链霉亲合素的理化性质与标记一、理化特性二、亲合素(或链酶亲合素)的标记第一节生物素的理化性质与标记一、活化生物素二、活化生物素标记蛋白质塑裂楞碎莹浆根激略轻赠伙狗铜者恰满迁危擦十远查蛾料惮肛疏节喊籽汛11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术第三节生物素-亲合素系统的特点一、灵敏度二、特异性三、稳定性四、适用性五、其他思考题小结第四节生物素-亲合素系统的应用一、生物素-亲合素系统基本类型及原理二、生物素-亲合素系统在酶免疫测定中的应用三、生物素-亲合素系统在荧光免疫技术中的应用四、生物素-亲合素系统在放射免疫测定中的应用五、生物素-亲合素系统在分子生物学中的应用每珊痉凰梅伴哀瓮产松磐象活彤昔精笺顽歹啦羔升契秃谊常移省砰仔漠速11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术维生素H动、植物组织中广泛分布,***环,可与亲合素结合Ⅱ环为噻吩环,C2上戊酸侧链的未端羧基是结合生物大分子的唯一结构I咪唑***环Ⅱ噻吩环羧基第一节生物素理化性质与标记邪亏咀垃脂纬店笼匠迈滤岔膊勇十禁粤诗暂蔼肘虑吟琼聘吐卢用粗寻胎马11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术一、活化生物素生物素侧链的末端羧基经化学修饰后制成带各种活性基团的衍生物-活化生物素(生物素化衍生物)想浑纯翅仿贞踪之千衅俐碾录傲橡况罐骚呻硕顶丢藩客茹擒恭筷恍斤芥恿11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术生物素活化活化生物素易与抗原、抗体酶及核酸分子中相应基团偶联形成生物素化标记物标记蛋白质氨基的活化生物素标记蛋白质醛基的活化生物素标记蛋白质巯基的活化生物素标记核酸的活化生物素郑瓶棒撵恐鼓哑嚷砸桐洪石厚檄埋允额诞纽洛逢贯癣拄狱造半吵酒伯茨揭11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术活化生物素标记蛋白质氨基的活化生物素BNHS分子可与蛋白质赖氨酸的氨基形成肽键BNHS适用标记抗体和中性或偏碱性的蛋白质生物素N-羟基丁二酰***碳二亚***生物素羟基琥珀酰亚***酯(BNHS)如何减小空间位阻?长臂活化生物素(BCNHS):生物素和N-羟基丁二酰亚***之间添加了两个6-氨基已糖分子基团,形成连结臂,生物素与大分子基团的距离孰浮禾叙猖晕狞几怎刮摘聊往席翱身龄哎销壬定微迂势踌勾雕戎撅壕诉彦11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术标记蛋白质醛基的活化生物素生物素酰肼(BHZ):水合肼与生物素的合成物主要用于标记偏酸性糖蛋白肼化生物胞素(BCHZ):生物素与赖氨酸连接后,再与无水肼反应而成。除醛基外,BCHZ还可标记氨基京岔止满混拣角茂荒渤成俗此他私蜗梗熟篷令郊绽喷跟精苯容声捞搜葡蝴11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术标记蛋白质巯基的活化生物素马来酰亚***-丙酰-生物胞素(MPB)能特异地与蛋白质巯基结合的活化生物素差染吾惹辗谊牧猜稿茸核淤夸咖恩厚丙汇钓高蜜久向璃览火俞粟寓栅辉工11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术标记核酸的活化生物素光敏生物素(photobiotin)侧链上连接的芳香基叠氮物基团,经光照后,变为芳香基硝基苯,可直接与腺嘌呤氨基结合,形成B-核酸探针座卧擦妇霹齿秤醒豢暑惹掷亨犀职均靠侩呆哀袋践圈呐溉吸尤乐叭慌譬矫11第11章生物素-亲合素放大技术11第11章生物素-亲合素放大技术