6PCR技术的基本操作和应用.doc

Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialusePCR技术的基本操作和应用本卷整理:【粤】蓝色冰点(庞淇尹广东省吴川市第一中学)()【答案】AD【解析】在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因,只要条件许可,都可发育成完整的个体。要能产生完整的个体,才能体现全能性。【试题点评】本题考查细胞全能性这一知识点,要求学生能根据细胞全能性的原理,对一些现象进行分析。属于理解层次。2011江苏33.(8分)请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DN***段,它是子链合成延伸的基础。①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DN***段所占的比例为。②在第轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DN***段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。①第1组:;②第2组:。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为。(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DN***段长度如下图(1kb即1000个碱基对),请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。33.(8分)(1)①15/16②三(2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DN***段的引物链上(4)见右图2011北京31.(16分)T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除,因为后者产生的会抑制侧芽的生长。(2)为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T代)。(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T代播种在含的培养基上,获得所需个体。(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与植株进行杂交,再自交代后统计性状分离比。(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性。(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是:提取植株的DNA,用限制酶处理后,再用将获得的DN***段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DN***断中选取作为引物进行扩增,得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。2011安徽31.(21分)Ⅱ.(9分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。