Cu2 ,Hg2 ,Cr2 对豌豆根尖细胞的微核效应.doc

Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuseCu2+,Hg2+,Cr2+对豌豆根尖细胞的微核效应摘要:以豌豆根尖为供试材料,以不同浓度的Cu2+,Hg2+,Cr2+为受检物质,采用实验分析与统计分析的方法,探讨Cu2+,Hg2+,Cr2+对豌豆根尖细胞的微核效应。结果表明Cu2+,Hg2+,Cr2+在一定浓度范围内,均能诱发豌豆根尖细胞产生一定的微核率,但不同的重金属离子,对豌豆根尖细胞的所起的微核效应则不同。关键词:Cu2+,Hg2+,Cr2+,豌豆,根尖细胞,微核率微核是指位于细胞浆中独立于主核的核小体,染色同主核,其直径一般为主核的1/3~1/2,主要由外界损害因素(生物、物理、化学)作用细胞后,导致细胞染色体丢失或断裂,从而在胞浆中形成1个或数个小核。多种实验已经证实,微核率的大小和作用因子的剂量有一定的关系[1]。故常用微核来检测各种理化因子对生物体潜在的遗传危害。如今环境重金属污染已引起广泛关注。植物对重金属的吸收、积累及重金属对植物的生理生化特性的影响已有较多报道,而其对染色体行为的影响少见报道。蚕豆根尖细胞在分裂期间对外界环境反应敏感,造成染色体畸变、微核等分裂异常现象。因此,本实验通过计算蚕豆根尖细胞分裂后微核的数量,来监测重金属Cu2+,Hg2+,Cr2+对环境的污染程度,即验证微核测定技术及其作为一种环境致突变性的检测手段的广泛应用性。、70%乙醇、改良品红、,,+、,,+,,,+,置于铺好含充足水分的纱布的培养皿中,在25℃的人工气候箱中培养2-3d。在此过程中要不断加水,保证种子生长所需水分。染毒处理待豌豆根长出后,选取长势较好的种子进行实验。每组选择两粒种子,吸干根部表面水分,用配置好的溶液浸泡其根部,进行染毒处理24h。-1cm移入卡诺氏固定液中,4℃条件下固定24h。用70%乙醇冲洗2次后转入70%乙醇中置4℃冰箱中保存待用。材料解离将从70%乙醇中取出的根尖材料用蒸馏水漂洗后置入60℃恒温水浴锅中预热的1mol/LHCl中,解离8-10min;然后用蒸馏水冲洗2-3次。制片将解离后的根尖材料用蒸馏水漂洗2-3次,置于载玻片上从根冠起切取根尖2-3mm,然后用改良品红溶液染色20min,盖上盖玻片,用手指轻压使染色区呈云雾状。镜检在显微镜下观察,凡小于主核1/3以下,同主核有相同染色效果的圆形、椭圆形或不规则形状的染色物质都可以算作微核。,结果如表1,其微核率明显低于重金属离子处理的,说明重金属Cu2+,Hg2+,Cr2+具有诱变活性,能诱发豌豆根尖细胞微核率的提高。表1不同溶液诱发的蚕豆根尖徽核率溶液mg/mL微核数/个观察细胞总数/个微核率/‰蒸馏水0,0,0,0,09410Cu2+/,2,4,5,32,1,0,3,20,1,0,0,+0.