AD模型大鼠神经生长因子及c-fos表达相关性的研究.doc

AD模型大鼠神经生长因子及c-fos表达相关性的研究.doc:..AD模型大鼠神经生长因子及c-fos表达相关性的研宄姚宏波孙丽慧廉洁刘丹阳(通讯作者)(齐齐哈尔医学院组胚教研室161006)【中图分类号】R651【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)50-0242-02【摘要】目的探讨AD模型大鼠海马神经元NGF及c-fos的相关性。方法60只大鼠随机分成五组,正常组、模型组、模型对照组、丙药组和电针组。用免疫组化法检测NGF及c-fos蛋白的表达,。结果电针组NGF含量高于模型组,c-fos蛋白含量低于模型组。电针可使大鼠海马NGF的表达增强,同时c-fos蛋白的表达降低。结论可能电针的刺激对c-fos和NGF表达之间有一定的相关性。【关键词】阿尔茨海默病电针NGF、c-fos阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)是以损害大脑记忆和认知功能为主,同时伴有精祌行为异常的一种中枢祌经系统退行性疾病。祌经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)是发现最早的一种神经营养因子。探索NGF的表达机理对于治疗神经损伤和神经元退变性疾病只有重要意义。近些年来发现即早基因c-fos是第三信使之一,在祌经损伤,脑缺血等疾病及AD模型中均表达活跃。c-fos在生理及病理性刺激时能被快速诱导,在将细胞外信号转变为长期持久的细胞表现型的改变中起作用[1]。研宄发现,在NGF基因内存在c-fos蛋白的结合位点。但c-fos是否与NGF的表达有相关性,目前尚无详细的报道。故木文研究了电针对老年痴呆模型大鼠海马中c-fos与NGF的表达特点,为进一步研究NGF的作用机制提供参考。,8〜9只龄,体重(220±20)g,经10%水合氯醛麻醉后,固定于脑立体定位仪。暴露硬脑膜,每侧侧脑室注射10%链脲霉素10µl。染标参考文献:,,。术后水迷宫试验。全部实验动物用相冋的饲料喂养,喂养过程中所使用的器皿均为非铝制品。:不做任何处理,常规饲养;模型对照组:每侧侧脑室各注射10&micrO;l生理盐水替代链脲霉素;模型组:每侧侧脑室各注射10%链脲霉素lO&microJ,第三天重复注射;西药组:〜lmg/kg灌胃,治疗30天;电针组:造模后用毫针针刺“百会”穴,,“大椎”穴,直刺约4mm。连接KWD-808II型全能脉冲电疗仪,频率为30Hz,电压为2V。针刺大鼠双侧“太溪”穴,直刺进针3mm,双侧“肾俞”穴,直刺进针5mm,双侧“足三里”穴,直刺进针4mm,间歇5min捻转一次。每日1次,吋间30min。一疗程为10天,间歇一天,治疗三个疗程。-fos和NGF均为多克隆抗体,其稀释度为1:100;Rb-Sp(SantaCruz公司,北京中山公司分装)。试剂盒中的生物素化二抗和SP复合物稀释度均为1:100。按常规SP法进行,暴露抗原方法略旮不同x-%胰蛋白酶,37°C,18〜20min;NGF为0