特殊染色.doc

Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuseForpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuse蚅字号:大中小螄第一节结缔组织和肌纤维染色薈VanGieson苦味酸酸性复红法(VG法)螆用途:VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。螃原理:酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力,结果胶原纤维被酸性复红染成红色,肌肉被苦味酸染成黄色。此方法是一种优良的传统方法。芃固定:10%福尔马林艿切片:4-6微米螇试剂:膆Weigert铁苏木精液:蚂A液:苏木精1g,无水酒精100ml。一般配制后需要数周或数月自然氧化,成熟后使用。聿B液:29%三***化铁水溶液4ml,蒸馏水95ml,盐酸1ml。袈两液分别配制,临用时A、B液等量混合,过滤后使用。24h后失去染色能力。芄VanGieson液:肂1%酸性复红水溶液   10ml螀苦味酸饱和水溶液   90ml蚆临用时1:9混合过虑后使用。蚆 薁VanGieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤:薀1. 石蜡切片脱蜡至水。蚇2. Weigert苏木精液5-10min。螅3. 充分水洗。芄4. VanGieson液1-5min。芀5. 95%酒精迅速分化数秒。蝿6. 无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。袃结果:胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。蚄体会与说明:由于酸性复红退色较快,染色结果不能长期保存,一般只能保存3~6个月。羁 薆二Masson三色法芅试剂:肃Regaud氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。螁将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。蚇Masson丽春红酸性复红液:,,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。%冰醋酸水溶液:,蒸馏水100ml。蒂1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100ml。蒁苯***蓝水溶液:苯***蓝2g,蒸馏水98ml,冰醋酸2ml。虿1%光绿水溶液:光绿1g,蒸馏水100ml。蚆Masson三色法步骤羂1. 石蜡切片脱蜡至水。节2. 铬化处理或去***盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。蒆3. 依次自来水和蒸馏水洗。袅4. 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。莁5. 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。螈6. 蒸馏水洗。薇7. 用Masson丽春红酸性复红液5-10min。羃8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。螁9. 1%磷钼酸水溶液分化3-5min。葿10.             不经水洗,直接用苯***蓝或光绿液染5min。蕿11.             %冰醋酸水溶液浸洗片刻。芅12.             95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。蒄结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。腿体会与说明:。,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。%冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳。、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制,肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。蒈 螆弹力纤维染色莃Schmorl染色法蚀石炭酸-品红液:碱性品红2g,无水酒精50ml,熔化石炭酸25ml,在37℃温箱过夜,冷后过滤。蕿Weigert间苯二酚-品红液:碱性品红1g,间苯二酚(Resorcin)晶体2g,蒸馏水100ml。袄      在锥形烧瓶内煮沸,加29%三***-5mine。冷后过滤,烘干滤纸及沉淀,放入烧瓶并加95%酒精100ml在水浴加温至染料全溶解,待冷却后过滤,并补足因加热蒸发的酒精至100ml。最后加浓盐酸2ml摇匀备用。螂弹力纤维Schmorl染色法步骤蒀1. 石蜡切片脱蜡至水。芆2. 石炭酸-品红液37℃染1h,或室温24h。芇3. 70%酒精漂洗。膁4. Weigert间苯二酚-品红液染色20-30min。膀5. 无水酒精分色约1/2h,%盐酸的95%酒精分色。莈6. 流水冲洗后换蒸馏水漂洗。莅7. 常规苏木精染核5-10min。薁8. 水洗。羁9. VanGieson液复染3-5min。葿10.             蒸馏水洗。蒃11.             酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。芄结果:弹力纤维蓝黑色,胶原纤维红色,肌纤维黄色,细胞核蓝色蚁 芆弹力和胶原纤维染色法袆试剂:螄维多利亚蓝染色液:维多利亚蓝(Victoriablue上海),糊精   0.