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· · 齐鲁药事.,.
.重组蛋白的诱导表达温度诱导经—凝就显得非常重要。本研究采用了℃诱导,结果表明能够
胶电泳扫描分析温度诱导培养的和重组菌体, 表达目的蛋白,然而是否有最佳的诱导温度还需做进一步的
测得表达蛋白干扰素一占细菌蛋白的左右图。探索。
诱导培养的表达菌株对目的蛋白的表达也有一定的影
响,本实验将这个重组表达载体转化人大肠杆菌表达菌株
和中,温度诱导培养后,经—实验检
测发现在菌株和中的表达量没有明显的差异,
其表达量都约占细菌总蛋白的左右。当然要证实菌株
对目的蛋白的表达是否有影响,一方面要在保证同等条件下
进行多次重复同一实验,另一方面需要把重组质粒转化到更
多的不同菌株中进行比较。
由于蛋白的疏水性,诱导菌所表达的猪干扰紊一大部
分都形成了包涵体,而不象其他蛋白那样游离在胞质中,因
此要纯化表达的猪干扰素一必须要经过包涵体的提取。
本实验从诱导的大肠杆菌中提取出了包涵体,但含量
不高,原因可能是诱导菌株本身分泌的目的蛋白的量不高,
也可能是包涵体的提取方法有待改进。
图猪干扰素一在大肠杆菌和中的高效表达参考文献
.蛋白分子量标准;.菌转化的是无目的基因的,.:—
载体,已诱导,作阴性对照;.菌转化的是带.,,: .
有目的基因的一载体,已诱导;.菌,.—
转化的是带有目的基因的一载体,没有诱
导;.口菌转化的是带有目的基因的一.—
载体,已诱导;:菌转化的是带有目的基因的。,:~ .
一载体,没有诱导;:菌转化的是带郭瀛军,吴丹,陈蕊雯,、表达及其纯
有目的基因的一/载体,,,:~ .
讨论曹瑞兵,周斌,陈德胜,、改造、表达及
本研究应用技术从转染细胞—,,:~ .
总中扩增出猪干扰素一基因,测序结赵英杰,徐红军,李尚波,
果与上公布的序列同源性为,,,:~ .
基因较为保守。.萨姆布鲁克美,..拉塞尔美著,
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