Bridging+integrator1在胃腺癌中的表达及预后价值.pdf

在胃腺癌中表达及预后的初步研究硕士生:刘传新导师:罗荣城教授摘要床表现症状则是模糊且不具特异性。大部份诊断出胃癌的病人被发现时都已经努力深入理解胃癌的生物学特性,以期提高早期诊断、预后和最终治愈,然而胃癌是世界第蟪<琢觥>」芙胧兰鸵岳慈蛭赴┓⒉÷视兴陆担但在中国的发病却率逐年上升。胃癌的分类可分为早期胃癌及进行性胃癌,临是进行性疾病来呈现。统计发现超过%的病人会进行手术,但是手术之后,大约.%的病人发生转移。转移性的胃癌仍然是一种无法治愈的疾病。一般而言,胃癌病人平均五年的存活率大约%左右,而晚期胃癌患者的五年的存活率更小于ヒ韵隆;Я品ㄒ丫晌N赴┲瘟撇豢扇鄙俚姆椒ㄖ唬汉的化学疗法已经被证明能提高存活率或末期生活品质。近年来科研人员一直在由于缺乏统一标准的化疗、放疗和手术切除,晚期胃癌患者的治疗结果很不理想。因此,阐明胃癌的发病机制,争取早期诊断,寻求有效的治疗手段是亟待解决的重要课题。胃癌的发展是受多种因素影响,许多致癌基因和肿瘤抑制基因参与其中,而最主要的是遗传学及表观学的异常。其中癌基因的激活与抑癌基因的失活是其重要的遗传学基础。相对于因功能获得性变异而导致的癌基因激活,抑癌基因的失活源自功能失去性变异,提高了肿瘤易感性,在肿瘤的发生、发展过程中起着更大的最用。鉴定参与胃癌形成的新基因,对这些基因的生物学性质进行研究,将有助于我们开发早期诊断方法,进行靶向治疗。本研究课题以与胃腺癌相关的候选抑癌基因为研究对象,检测了它们在胃腺癌中的表达情况,并初步探讨了关于预后方面的可能因素。硕士学位论文
材料与方法等发现在人乳腺癌细胞株和乳腺癌组织中存在的缺失。另一些研究发现基因在乳腺癌、前列腺癌和恶性黑素瘤中表达下调或失活,其异本研究诣在检测在胃腺癌中的表达情况,分析其与临床病理参数及预后的关系,探讨其在危险中发挥的作用机制。经南方医院伦理委员会批准和签署知情同意书后,从年到年之间在南方医院接受手术的胃腺癌患者中,获得菔竦奈赶侔┭尽怯扇旧上长度达沃械鐾庀宰颖嗦耄切录ǖ挠兄琢鲆种苹蛱卣鞯娜死嗷产物。最初是由于它可干涉并抑制诱导的癌变而被鉴定的。位再表达与细胞程序化死亡过程有关。确⑾諦娜笔в肴橄侔┙褂关。此外,,%的小鼠自发产生肺癌,%的小鼠产生肝癌。上述结果提示可能具有肿瘤抑制基因的功能。患者肿瘤组织样本所有的患者均未接受术前治疗。患者包括荒行院慌裕骄炅岁炅浞段。所有的组织块均切割成窳衅W橹学分型按照世界卫生组织的分类标准进行。从年到年之间在南方医院接受手术切除的胃腺癌患者中,获得另外共计份新鲜肿瘤组织和相邻的非肿瘤组织样本。患者均未接受任何术前治疗。患者包括位男性和位女性,平均年龄岁炅浞段。所获得的组织样本立即浸入琔4嬗。所有的患者均按照第婀士拱┝C中瘤、淋巴结及远处转移制谙低辰蟹制凇荧光定量按照厂商说明,使用溶液拦鶬从约原发性肿瘤中提取总J褂梦轗的鼶污染。用摘要
公司衄测得光密度值,分光光度计停拦鶷计算总ǘ取8莩痰慕ㄒ椋褂嵋总蚆反转录酶骰旌弦美国公司约懊慷寡核苷酸引物。扩增反应条件为:在变性分钟,退火秒,共个循环。每个样本检测两次,每个实验使用从不同反从石蜡包埋的胃腺癌组织块切割厚度为用乙醇梯度再水化。对于抗原修复,切片在中于在室温下进行蛋白质封闭分钟。组织切片与一抗拦鶶:∈在跤埂S肞洗涤魏螅衅肷锼鼗亩在室温下孵育分钟。最后用’二氨基联苯***四盐酸,显影可视信号,所有的切片都用苏木精复染。细胞阳性。免疫染色得分范围从。我们对表达水平定义如下:‘得分;‘得分弧得分;‘得分T诒狙芯恐校硕士学位论文国反转录合成第一条链。所产生的进行荧光定量訥诓位和的相对表达水平进行评估。相应的引物对:’一瓹J褂肦荧光定量墙谢蛱匾煨岳┰,“秒和转录得到,至少重复两次。通过比较值进行相对定量分析。免疫组织化学琁治的组织切片。切片脱石蜡,·种印S胮逑春螅%旧ń峁陌攵糠治鋈缦拢阂跣裕:肿瘤细胞无染色;;:%以上肿瘤一篏’::罶
结果胶中分离嵋蛋白质样品,之后转移到膜上。用ネ阎D谭獗辗翘异性结合位点∈焙螅肂嗫寺∫豢∈停拦鶳单因素和多因素分析,使用壤缦漳P脱芯苛俅膊±。另外,籌期和Ⅳ期患者中有位%腂‘硪跣员泶铮’,‘’和‘粲谘粜员泶铩蛋白质印迹分析在裂解缓冲液中使胃腺癌组织和非肿瘤组织裂解。在%公司孵育过夜。用洗涤膜三次之后,用适当的二抗与膜在室温下孵育∈薄H缓笫褂迷銮啃突Х⒐庀低拦鶳进行膜检测。。使用贮检验和喙叵凳治鯞泶锖透髦至俅膊±硌卣髦涞相关性。⑼ü毙蚣煅榻斜冉稀6