头花蓼抗炎化学成分群以及抗炎作用地研究.docx

头花蓼为贵州著名的苗族用药,其在临床上对泌尿系统的感染有着显著的疗效。但国内外对其研究报道不多,且主要集中在对其化学成分的分离研究和临床药理研究。而对其抗炎有效部位的探索和具体的作用机理在国内外研究尚属空白。本研究旨在通过研究头花蓼水提物对LPS诱导显著升高的三个抗炎因子NO,TNF-α,PG2的影响,从分子机制上探索其抗炎作用并初步推测其所作用的抗炎通路。本研究还建立了HPLC方法对头花蓼水提物中的各有效成分的组成和含量进行测定,分离出两个有效成分单体并对其进行结构鉴定。从而为进一步探索分离头花蓼中的有效抗炎成分打下了良好的基础。
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。,结果证明300mg/,且其IC50>该实验的最高浓度(500mg/ml).
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查阅相关文献,LPS对于炎症因子TNF-α,PG2的诱导浓度是一致的,而LPS对于炎症因子NO的诱导浓度有不同的报道,本研究拟通过检测不同浓度LPS对NO诱导的效果,从而确定其最佳的诱导浓度。经过检测,10μg/ml的LPS对NO的诱导效果最好,%,所以以此浓度做为LPS诱导NO升高的最佳浓度。
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本研究分别选择NO,TNF-α,PG2三个典型的炎症因子做为头花蓼抗炎作用的检测指标,并检测不同浓度的头花蓼水提液对LPS诱导的这三个炎症因子升高的影响。实验结果显示,不同浓度的头花蓼水提物对LPS诱导的NO,TNF-α,PG2升高均有良好的抑制作用,且其效果呈剂量依赖性,其抗炎作用与头花蓼临床实验所得出的抗炎结果是吻合的。而头花蓼水提物低浓度对PG2的抑制作用要好于其对NO,TNF-α的抑制作用。初步推测其抗炎作用靶点可能在花生四烯酸的代谢途径上,需要进一步的分子生物学实验来论证。
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本研究建立了简单,快捷,灵敏的HPLC分析方法,HPLC方法为:以VenusilMPC18(250×,5μm)色谱柱为固定相;流动相:A为水-N,N-二***甲酰***-冰醋酸(81∶15∶3),B为色谱甲醇,梯度洗脱,洗脱程序为:0~30min,95%A-30%A,5%B-70%B30~40min,30%A,70%B;40~43min,30%A-95%A,70%B-5%B;43~48min,95%A,5%B。检测波长为272nm,,柱