抑制小胶质细胞MT1-MMP表达对胶质瘤侵袭和迁移的影响.pdf

抑制小胶质细胞泶锒越褐柿侵袭和迁移的影响硕士研究生:义勇军指导教师:柯以铨摘要质瘤标本进行免疫组化的实验中发现,在脑胶质瘤组织中有大量的小胶质细胞及巨噬细胞集聚现象,同时还伴随少量的淋巴细胞浸润。对于脑胶质瘤组织中硕士学位论文研究背景和目的长期以来中枢神经系统被认为是一个免疫特免器官,缺少外周免疫细胞、与免疫相关的部分细胞因子及血浆蛋白。然而年等的脑肿瘤移植实验中证实,移植部位周围有轻度的淋巴细胞浸润及小胶质细胞增尘,提示中枢神经系统并非绝对免疫特免器官。小胶质细胞在中枢神经系统的免疫监督中具有关键作用,但近年来随着分子生物学的发展,人们发现小胶质细胞还胶质瘤的发展密切相关。脑胶质瘤是人神经系统中发病率最高、恶性程度最高、预后最差的⋯侄性肿瘤。随着医疗技术的发展,虽然目前胶质瘤的诊断和治疗方法有了较大的进步,但疗效尚不令人满意,大部分恶性胶质瘤病人生存期在一年以内。早在辏琖ü阅越褐柿鲎橹旧ü鄄欤谝淮蜗晗傅孛枋隽私褐柿组织中小胶质细胞的存在。脑胶质瘤被证明具有免疫原性,但奇怪的是在肿瘤发生发展过程中并未发现机体对肿瘤产生明显的免疫反应。对手术切除的脑胶出现高水平的小胶质细胞浸润,目前倾向于认为是由于胶质瘤细胞在肿瘤的生长过程中向周围细胞微环境分泌释放趋化分子及生长因子等物质所致。研究表明,胶质瘤病灶中的小胶质细胞对胶质瘤细胞及细胞碎片几乎尤吞噬现象出现。胶质瘤相关小胶质细胞/巨噬细胞尽管仍能表达样
受体襎及其配体的相互作用仍存在,但是不能引起激活而增强细胞身吞噬功能;另外,由于缺少必要的刺激分子虲谋泶铮珿荒芴峁┏渥愕拇碳ひ约せ頣淋巴细胞。在对从老鼠分离培养的小胶质细胞的研究中发现,胶质瘤相关小胶质细胞在受到刺激信号后并不上调第二型主要组织相容性复合体—谋泶铮灾劣谛胶质细胞所表达的主要组织相容性复合体蛔阋越锌乖实菁せ頣淋巴细胞,而在无胶质瘤细胞的情况下小胶质细胞可明显的增强甀癇促炎症因子甉能力。另外,胶质瘤细胞促使活化小胶质细胞分泌释放白介素.,后者抑制小胶质细胞由猋诱导的肿颖泶镆鹂乖呈递功能下降,直接导致小胶质细胞难以激活馨拖赴R陨献柿媳砻鳎于受到胶质瘤细胞对小胶质细胞的吞噬、抗原呈递及分泌释放促炎症因子等功能的抑制,小胶质细胞在胶质瘤组织中不能启动针对癌细胞的、有效的固有性近期研究表明,小胶质细胞与胶质瘤微环境免疫抑制及促胶质瘤增殖、浸润有密切关系。金属蛋白酶所诱导的基质降解机制在胶质瘤侵袭和和被认为与肿瘤的侵袭与迁胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移过程“铺路”。研究发现,胶质瘤能够引起小胶质细胞膜上籑表达升高,而小胶质细胞籑高表达又反过来促进微环境中,最终促进胶质瘤侵袭和迁移。因此,如果能够抑褐氏赴写胶质瘤相关的表达,则有望降低胶质瘤侵袭和迁移的能力。阿托伐他汀是霍且一***戊二酰辅酶瓹乖敢种萍粒直以来作为治疗心血管疾病药物被广泛应用于降低血液中胆固醇含量,但最近摘要的表达。胶质瘤细胞能够下调脂多糖盏嫉幕罨〗褐氏赴置谑头及适应性免疫反应。迁移过程中具有关键性的作用。移最为密切相关,而小胶质细胞和胶质瘤细胞本身均是的重要细胞来源。这些被分泌释放入肿瘤微环境,参与降解胶质瘤细胞外基质,
为干预因素探讨其是否能够影响胶质瘤细胞和小胶质细胞之间表达及其疞阿托伐他汀作用于细胞琔胶质瘤细胞与和小胶质细义弧旷疞各组褐柿鱿赴胄〗褐氏赴盍τ攵哉发现阿托伐他汀具有抗肿瘤作用。在内皮细胞及多种肿瘤中观察到他汀类药物对、和甅的抑制作用。因此,我们选择阿托伐他汀作对胶质瘤侵袭和迁移影响。方法~ǘ考觳馓荻扰ǘ劝⑼蟹ニ《栽诵〗褐氏赴蚒胶质瘤细胞活性影响。⑾赴ㄒ剖笛楹椭琢銮窒笛椋和ü褐柿鎏跫嘌孵化小胶质细胞,制备小胶质细胞条件培养基Sτ肨细胞迁移实验和肿瘤侵袭实验,检测稍は耈侵袭和迁移能力,同时使用阿托伐他汀干预趸〗褐氏赴票窶过程,检测窒颓ㄒ颇芰Ω谋洹⒚鹘好钙追ḿ觳獍⑼蟹ニ「稍は耈胶质瘤细胞蚆表达,及阿托伐他汀与:细稍は滦〗褐氏赴鸐一蚆表达。霳蟹ニ「稍は耈胶质瘤细胞籑、、蚉—泶铮鞍⑼蟹ニ∮隚联合干预下小胶质细胞籑、猵、狤和狫表达。觳獍⑼蟹ニ「稍は耈胶质瘤细胞、和狹相关基因表达,及阿托伐他汀与:细稍は滦〗褐氏赴、和甅相关基因表达。结果胞细胞活力均明显降低,与对照组相比,差异有统计学意义。‘疞阿托伐他汀显著增强小胶质细胞活力,与对照组相比,差异有统计学意组相比无明显变化,≡褚┪安拿浓度内最大药物浓度巧疞作为后续实验药物浓度。硕士学位论文
疞阿托伐他汀干预倍镜下质瘤细胞迁移平均数为..,褐柿鱿赴迁移平均数为.,与对照组相比显著增加,差异有统计学意义肿瘤侵袭实验:稍,每毒迪耈细胞侵袭平均数为..攵哉兆閁细胞侵袭平均数..啾认灾黾樱钜煊型臣疞阿托伐他汀