生化试剂的基础知识.docx

腿生化试剂的基本知识膄羅莂一、 生化试剂的分类 2羇(一) 按照化学性质分类 2薆(二) 按照临床应用分类 2蒄二、 反应速度特性 2肂(一) 终点法试剂 2羈(二) 动力学法试剂 3蚅三、 显色原理 4袃(一) NAD-NADH和NADP-NADPH系统 5薈(二) p-NP和p-NA系统 5聿(三) H2O2偶联的指示系统 5肇(四) 抗原抗体反应指示系统 5芃(五) 其它显色反应 6荿四、 性能评价方法 6袇(一) 主要性能指标: 6膅(二) 性能评价方法 6蚂聿袈生化试剂的分类芄按照化学性质分类膁酶类:包括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α-HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE等。蝿底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,TBA,NH4+,CO2等。羀无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl等。蚆特种蛋白类:包括apoAl,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。薁按照临床应用分类薀无机离子:包括Ca,P,Mg,Cl等。螇肝功能:包括ALT,AST,r-GT,ALP,MSO,T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等。螄肾功能:UA,UREA,Cr等。芄心肌酶谱:CK,CK-MB,LDH,α-HBDH,AST,MSO。芀糖尿病:GLU等。螈前列腺疾病:ACP,p-ACP等。***胰腺炎:α-AMY。蚄血脂:TC,TG,HDL-C,LDL-C,apoA1,apoB,Lp(a)。肀痛风:UA。薆有机磷中毒:ChE。芅免疫性疾病:C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM,Kappa链,Lambda链。肃反应速度特性螁按照反应速度,可以分为终点法试剂和动力学试剂。而动力学试剂又可再分为零级动力学法和一级动力学法。蚇终点法试剂莄终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是最理想的分析类型。如图(1)。薂整个反应达到平衡,由于正向反应的平衡常数很大,可认为所有的被测定物已转变为产物,反应液的吸光度不再增加(或降低),吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。薁终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小的改变不敏感,只要这种改变不影响在一定时间内反应达到平衡即可,是最理想的反应模型。螈螆图(1)羂属于终点法的试剂主要有:节TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,Glu,TP,Alb,T-Bil,D-Bil,Cr(氧化酶法),NH4+,CO2,Ca,P,Mg,Cl,apoA1,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。薆动力学法试剂袄零级动力学法莁零级动力学法,指反应过程中反应速度维持不变,达到最大,与底物浓度无关,因此,在整个反应过程中,反应物可以匀速地生成某个产物,导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加,减小或增加的速度(△A/min)与被测物的活性或浓度成正比,主要用于酶活性的测定。如图(2)。肂实际上,由于底物浓度不可能足够大,随着反应的进行,底物消耗到一定程度后,反应速度不再维持不变,同样从启动反应到达到最大速度需要一定时间。因此,零级动力学法是针对特定时间而言的,各试剂商对这段时间有严格规定。薇芇图(2)肄属于零级动力学法的试剂主要有:蒈ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α-HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE,TBA等。虿一级动力学法莅在一定的反应时间内,反应速度与底物浓度的一次方成正比,由于底物在不断的消耗,因此整个反应的速度在不断的减少,表现为吸光度的增加(或降低)速度越来越小,这类反应达到平衡的时间很长,理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,经过一段延迟时间才能进入稳定反应期,必需在特定时间段内进行监测,各试剂商对这段时间有严格规定。如图(3)。蒄在一固定时间间隔中,底物浓度的变化量正比于底物的初浓度,这是一级反应的同性。该段时间内吸光度的增加或降低与被测物的浓度成正比。艿蒆图(3)蒃属于一级动力学法的试剂主要有:羃Cr(苦味酸法),UREA(紫外监测法)罿显色原理蒇显色系统主要有以下几种:袆NAD-NADH和NADP-NADPH系统莃p-NP和p-NA系统蝿H2O2偶联的指示系统蕿抗原抗体反应指示系统羄其它显色反应螂NAD-NADH和NADP-NADPH系统蒀NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰,而NAD和NADP在340nm无特征性吸收峰,利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应,根据340nm吸光度的变化,可以测定物质