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不同花色白芨四种DNA条形码的序列分析.docx


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不同花色白芨四种DNA条形码的序列分析摘要:采用CTAB法提取2种花色白芨基因组DNA,选用trnH-psbA、rbcL、ITS、LSUD1-D34种植物DNA条形码通用引物进行PCR扩增,分析黄花、紫花白芨(Bletillastriata)4种DNA条形码的序列,扩增产物纯化后连接T载体并测序,用DNAMAN软件对测序结果进行多序列比对分析。再根据SNP位点设计引物,利用位点特异性PCR扩增进行鉴定。结果表明,4对植物DNA条形码通用引物均能进行扩增,其中trnH-psbA序列没有发现SNP位点、rbcL序列出现2个SNP位点、ITS序列出现62个SNP位点、LSUD1-D3序列出现3个SNP位点。根据LSUD1-D3序列上的2个SNP位点设计的引物DUAN5(5′-TAGTAACGGCGAGCGAAC-3′)和JDHH(5′-G-3′)能准确鉴定出黄花白芨,成功获得鉴定黄花白芨的引物序列。关键词:白芨(Bletillastriata);DNA条形码;PCR;SNP中图分类号:R282文献标识码:A文章编号:0439-8114(2018)17-0106-05DOI:-(资源服务)标识码(OSID):Abstract:(trnH-psbA,rbcL,ITSandLSUD1-D3),:---(5′-TAGTAACGGCGAGCGAAC-3′)andJDHH(5′-G-3′)ordingtotheSNPlociinLSUD1-:Bletillastriata;DNAbarcode;PCR;SNP白芨(Bletillastriata)伎疲orchidaceae)白芨属(Bletilla)多年生草本植物,是中国重要的中药材。商品白芨为白芨属白芨假鳞茎制成的干燥块茎,性平味苦,具有敛气、渗痰、止血、消肿等功效,主要用于治疗咳血、吐血、外伤出血、溃疡病出血等。白芨属植物全世界共有6种,其中中国有4种,即华白芨(Bletillasinensis)、小白芨(Bletillaformosana)、白芨(Bletillastriata)和黄花白芨(Bletillaochracea)[1]。主要分布在贵州、广西、安徽、四川、云南、陕西和湖北等地,其中以贵州、广西、湖北、安徽野生种质资源分布最为丰富。由于白芨种子发育不完全,常规条件下很难发芽。近年来,随着药理研究的深入,市场需求强劲增长,人们疯狂采挖野生资源,导致野生白芨资源急剧减少。为满足日益增长的市场需求,白芨组培快繁技术与直播技术相继研发成功[2-5],全国各地掀起白芨人工种植热潮。但是,用于繁育种苗的白芨果荚均没有经过品种选育,而是采集于

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  • 时间2019-05-17
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