尿蛋白定性试验.doc

目的掌握尿蛋白定性试验的方法。方法一磺基水杨酸法原理在酸性条件下,磺基水杨酸的磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性蛋白盐沉淀。器材小试管或凹玻片。试剂200g/L磺基水杨酸溶液:磺基水杨酸200g溶于1000ml蒸馏水中。标本来源病人不同程度的蛋白尿标本。尿蛋白定性结果判断反应外观结果报告相当蛋白质含量(g/L)仍清澈透明(-)<(±)~,但无颗粒(+)~(++)~(+++)~(++++)>:1、加尿液在2支试管中各加清晰尿液1ml(如为混浊尿标本,应离心后取上清液;碱性尿应加冰乙酸数滴,使尿液pH为5左右再试验)。2、加试剂在1支试管中加磺基水杨酸2滴并混匀,1min时与另1支试管中空白尿液比较,判断结果。3、判断结果见表。报告方式尿蛋白定性:阴性或阳性(磺基水杨酸法)本法结果阳性,即可报告阳性。必要时可用加热乙酸法证实,并以加热乙酸法为准报告结果。方法二加热乙酸法原理加热煮沸使蛋白质变性凝固,加乙酸使尿pH接近蛋白质等电点(pH5左右)而加速蛋白质沉淀。器材中试管、木夹、酒精灯。试剂5%(V/V)冰乙酸溶液。标本来源病人不同程度的蛋白尿标本。操作步骤1、加尿液在试管中加清晰尿液至管高2/3处,混浊尿标本应离心后取上清液再试验。2、煮沸尿液用木夹夹持(或手持)试管下1/3处,加热煮沸试管上1/3处内的尿液(注意:应不断转动试管均匀加热,防止尿液沸溅)。3、观察结果将试管上部加热处尿液与试管下部未加热尿液比较;观察有无混浊变化。4、加试剂在试管中加入5%(v/v)冰乙酸2滴。5、再煮沸尿液、立即观察结果,方法同步骤3。6、结果判断和报告见表。报告方式尿蛋白定性:阴性或阳性(加热乙酸法)方法三干化学试带法方法学评价尿蛋白定性阳性有重要意义,通常筛检试验阳性时,应再用第二种尿蛋白检测方法加以确证。目前,尿蛋白质定性试验,最常用的是干化学试带法,磺基水扬酸法次之,加热乙酸法用于确证。1、干化学试带法只对白蛋白敏感(70mg/L),对球蛋白不敏感,故不适用于肾病患者;但操作简便快速。2、磺基水杨酸法与白、球蛋白等均起反应,敏感性高(50mg/L),为筛检试验之首选,但易出现假阳性。碱性尿时可出现假阳性;反应时间超过lmin,阳性程度增加,故应准时观察判断结果。本法还可用以筛查本周蛋白尿,即被检尿遇此试剂出现浑浊,但加热后消退。3、加热乙酸法与白、球蛋白均起反应,敏感性较低(150mg/L)、但检测结果可靠、常作为尿蛋白可疑或阳性的确证试验;非新鲜尿可出现假阳性;电解质含量少的尿液或加乙酸量过多过少(超过pH等电点)本反应可呈假阴性,前者可在尿中加1~2滴饱和***化钠纠正后再试验,后者则强调加酸量须适当。参考值阴性。临床意义尿蛋白定性阳性称为蛋白尿,主要反映了肾小球通透性增加或肾小球和(或)肾小管损害。持续性蛋白尿是肾脏病变的重要指标,其阳性程度一般与病变程度呈正相关。1、肾前性蛋白尿多发性骨髓瘤所致本周蛋白尿、血红蛋白尿、急性溶血或挤压伤等所致肌红蛋白尿。2、肾性蛋白尿多由肾小球或肾小管疾病如急慢性肾小球肾炎、间质性肾炎等;高血压肾病,药物重金属中毒等所致。3、肾后性蛋白尿多因肾盂