孕酮检测作业操作全过程.doc

Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuse螀天马行空官方博客:http://t./tmxk_docin;QQ:1318241189;QQ群:175569632蚇蒂1原理肀本方法是酶联免疫分析技术与磁性微粒分离技术相结合的一种测定法,并使用一种高亲和力的多克隆抗体作试剂。标本、标准与质控液的孕***与确定量的孕***荧光素标衍生物与限量的标有一种酶的孕***单克隆抗体竞争结合。本法还采用一种特殊试剂将孕***从性激素结合蛋白中置换出来,来测定流动孕***的总量。被抗体结合的孕***荧光素标衍生物的量与样品中孕***的含量成反比。37℃孵育15分钟后,加入偶联有磁性微粒的抗荧光素抗体,其快速而特异地与荧光素孕***和抗孕***抗体的复合物结合,不需离心,在磁场中沉淀。倒去上清液,洗涤沉淀物,加入一种酶基质液,37℃孵育15分钟后,加终止液结束酶反应。然后用分光计测量酶反应所生颜色的浓度。酶反应所生颜色的浓度在测定的工作范围内与样品中孕***的浓度成反比。标本或质控液中孕***的含量就可用内推法直接从标准曲线中求得。***℃电子恒温水浴箱、BIOCHEMI型酶标读数仪、、100毫升量筒、塑料试管、,于室温平衡30分钟。并轻轻摇匀试剂及标本。,根据待测标本数及试剂盒要求的质控数、标准品数设计加样蓝图及实验模式。(37℃)及移液器的准确性。。洗液配制,标准曲线绘制、质控参考等。、标准、质控时要注意,冻融或长期存放的标准、标本、质控血清加样前要混匀,有絮状沉淀时应离心取上清液或过滤絮状物。,试管及吸嘴一次性使用。,于有效期内使用。:,彻底混匀,稀释后2-8℃储存,用至失效期。:按试剂盒原装液使用。使用时若发现颜色改变或有絮状沉淀禁止使用。:硫酸具有腐蚀性,加样时避免接触皮肤及眼睛。按试剂盒原装液使用。:每管底物溶液300微升于37℃水浴培养30分钟,然后加1000微升终止液终止反应。,应静置于磁性分离器上至少10分钟,务必于2小时内读取全部吸收率。:通过酶标读数仪读取标准液吸收率及浓度,绘制标准曲线,读取标本、质控液的吸收率及浓度值,综合质控液值、标准曲线上的截距、斜率、最大值与最小值等各参数的情况,以确定本次结果的可靠性、准确性。***的浓度即每个检测标本的浓度,然后对号入座地将其填写在报告单上。羃5工作流程肁取出试剂盒及冷藏的血清标本复温30分钟螇设计加样蓝图蒅加入标本稀释液100微升螂加入标本、标准及质控液50微升膁加入抗孕***荧光素标衍生物200微升膈加入抗孕***抗体200微升***37℃孵育15分钟螅加入磁性分离液200微升孵育37℃5分钟芁置磁性分离器上2分钟,弃上清液蕿蚅加入洗涤液500微升,置磁性分