实验一无蛋白血滤液的制备(无蛋白血滤液制备的基本原理是以蛋白质沉淀剂沉淀蛋白,用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。常用的方法有三***醋酸法、氢氧化锌法、黑灯改良法及福林-吴宪法(钨酸法),本实验采用最后一种方法,即钨酸法制备无蛋白滤液。·实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸。血液中的蛋白质在pH小于其等电点的溶液中时,可被钨酸沉淀。沉淀液过滤或离心,上清液即为无色、透明、pH约为6的无蛋白血滤液。可供非蛋白氮、血糖、氨基酸、尿素、尿酸及***化物等项目测定使用。·实验试剂:10%钨酸钠溶液,1/3mol/L硫酸溶液·实验对象:新鲜鸡血·操作步骤:取50ml锥形瓶或大试管1支,吸取充分混匀的抗凝血1份(1ml),擦净管外血液,缓慢放入锥形瓶或试管底部准确用10ml移液管加入7ml蒸馏水,随加随摇,但也不能过于剧烈再加入1ml硫酸溶液,随加随摇放置约5min后,若振摇亦不再发生泡沫,说明蛋白质已完全变性沉淀,用滤纸过滤后即得完全无色的无蛋白血滤液·实验过程(附图):,可观察到血色鲜艳明亮,,只是血液颜色稍稍变浅,,可以观察到血液颜色变得暗淡,但并没有出现凝聚等反应现象,这一步主要是为钨酸(钠)与血液中的蛋白反应提供酸性环境。,可观察到血液颜色变为棕褐色,且变得浑浊有气泡;容器壁上有痕渍,,故实验操作成功附录:以上实验过程(图片)是第二次操作的结果,第一次操作时因为加入试剂时过快,没有做到随加随摇,故有很多气泡,效果不是很理想,遂又操作了一次。现附上第一次操作的图片以作对比。(兴农楼208)以下无正文仅供个人用于学****研
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