本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。.doc

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒使用说明书 【人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒试剂盒名称】人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒【人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒试剂盒用途】定量人血清、血浆及相关液体样本中NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)的含量【人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)含量。【人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:200ng/:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、、【人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸【人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【人NLR家族,凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA检测试剂盒样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3)