梅毒实验室检测.doc

肈蒃张国军(首都医科大学附属北京天坛医院实验诊断中心) 莁聿腿写在课前的话袆梅毒是一种慢性、系统性疾病。学员通过本课件的学****要熟悉梅毒的定义、传播途径及临床分期;掌握不同时期梅毒的治疗方法;掌握梅毒实验室检测方法和梅毒免疫学反应;掌握梅毒血清学实验的原理、特点及各自优缺点;掌握先天性梅毒和神经梅毒的诊断方法。、系统性性传播疾病。人体受感染后,螺旋体很快播散到全身,可侵犯全身各组织与器官,临床表现多样,且时隐时显,病程较长。梅毒早期主要侵犯皮肤及粘膜,晚期除侵犯皮肤、粘膜外,还可侵犯心脏血管系统及中枢神经系统等全身各个系统;另一方面,梅毒又可多年无症状而呈潜伏状态。蒀主要传播途径:性接触传染是最主要的传播方式;其次是垂直传播。随着梅毒在人群中流行率升高,母婴垂直传播发生率日益上升,并伴随着包括诊断、治疗、阻断等在内的一系列问题;第三,输血传播。输血传播曾经是梅毒重要的传播方式。但随着血液筛查的广泛开展及输血的减少,梅毒经输血传播已很少发生。但近年来,由于艾滋病的流行,梅毒仍然是输血安全的威胁。肈临床分期:一期梅毒:主要表现为单个、无痛性的硬下疳,通常在感染梅毒螺旋体后3-4周出现;二期梅毒:一期梅毒不经治疗,梅毒螺旋体在几周到几个月后会播散到血液中,引起二期梅毒。二期梅毒的临床表现多样,常见发热、淋巴结病、弥漫性皮疹、生殖道或会阴湿疣等。一、二期梅毒统称为早期梅毒;莇三期或晚期梅毒:在最初感染的数年至十数年后发生,可累及任何器官,常见梅毒瘤性梅毒、心血管梅毒以及神经梅毒。隐性梅毒:无症状但梅毒血清学试验呈阳性。分为早期隐性梅毒(病程一般在一年以内)和晚期隐性梅毒(病程一般在一年以上)。。袅早期梅毒的治疗首选240万单位苄星青霉素G单次肌肉注射。对青霉素过敏者,替代治疗方案有强力霉素,口服,每次100mg,每日2次,持续2周,或四环素,口服,每次500mg,每日4次,持续2周。蒅早期隐性梅毒的治疗方案与早期梅毒相同。莃晚期隐性梅毒的首选治疗方案为每周一次肌肉注射240万单位苄星青霉素G,持续3周;对青霉素过敏者,替代治疗方案有强力霉素,口服,每次100mg,每日2次,持续4周,或四环素,口服,每次500mg,每日4次,持续4周。羁合并HIV感染、梅毒瘤性梅毒、心血管梅毒的治疗方案同晚期隐性梅毒相同。袇神经梅毒治疗只能采用青霉素,静脉注射水溶性青霉素G,每4小时300-400万单位,持续10-14天,或肌肉注射普鲁卡因青霉素G,每天240万单位,持续10-14天,同时口服丙磺舒,每日500mg,每日4次,持续10-14天。孕妇的治疗只能采用青霉素,青霉素过敏者需经脱敏后再治疗。薃螂螁羈羆早期梅毒应如何治疗?:是主要的梅毒病原学诊断方法,是最特异的一期梅毒检测方法。取材部位以硬下疳为主,也可从宫颈、***、淋巴结等处取材。阳性可确诊,阴性不能排除梅毒(需在3周内不同的3天采样检测,才能得出阴性结果)。暗视野显微镜法诊断的准确性受操作者的经验、病灶中活螺旋体的数量以及口腔、肛门破损处存在的非致病性螺旋体等因素的影响。肄镀银染色法:与暗视野检查法的临床意义基本相同。该法利用梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染成棕黑色,再通过普通高倍显微镜进行观察。薁直接免疫荧光法(DFA):是目前国外采用较多的方法,其特异性及敏感性均优于暗视野显微镜检查法。将特异性的抗梅毒螺旋体单克隆抗体用荧光素标记,如果标本中存在梅毒螺旋体,则通过抗原抗体特异性结合,在荧光显微镜下可见到发苹果绿色的梅毒螺旋体。此法可区分梅毒螺旋体和其他非致病性或条件致病性螺旋体。节聚合酶链反应(PCR):能对***溃疡进行早期鉴别诊断,区分梅毒、***疱疹和软下疳。它又可分为PCR和RT-PCR。PCR的设计主要针对编码梅毒螺旋特异性抗原和TpN47的DNA开放编码区,常见的引物有K03A、K04、47-1、47-2、47-3、47-4等。由于在PCR中会偶然出现非特异的PCR产物而干扰结果,因此必须用特异性DNA探针进行DNA-DNA杂交来提高PCR的特异性及敏感性。此外,由于TpN47的保守性,雅司螺旋体可产生类似的PCR产物,所以这种设计的PCR不能区分梅毒和雅司;但可以区分梅毒螺旋体和引博氏疏螺旋体,这就可以解决梅毒与莱姆病之间血清诊断中的免疫交叉的问题。螇另外一种是RT-PCR,常见的设计是针对梅毒螺旋体的16srRNA366bp片段,这种方法污染少,特异性敏感性都比较高,但价格也较高。PCR在梅毒持续感染中的诊断价值目前还没有一致的意见,理论上讲PCR可以查出死亡的TP,所以治疗后PCR阳性并不意味着治疗失败,但死亡的