细胞培养箱消毒使用和维护.doc

细胞室二氧化碳培养箱的消毒使用和维护体外培养的细胞和体内细胞一样,不仅需要营养物质,更需要一个稳定的生活环境,如温度、CO2浓度、湿度等,二氧化碳培养箱则是最佳选择。二氧化碳培养箱是在普通培养的基础上通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞在生物体内的生长环境,如合适的温度(37°C)、恒定的CO2水平(常用5%)、稳定的酸碱度(pH值:-)、较高的相对饱和湿度(常用95%),来对细胞或组织进行体外培养的一种装置。其用途甚广,主要用来培养细胞、组织和某些特殊微生物,为它们提供一个良好的体外环境,广泛应用于细胞学实验、微生物学实验、组织学实验以及分子生物学实验。因此,CO2培养箱的消毒和维护尤为重要。 1、二氧化碳培养箱的污染凡混入CO2培养箱(细胞培养环境)中,对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染。细胞持续在污染环境中生长时,轻者细胞生长缓慢,细胞分化变形,较重的细胞增殖停止,从瓶壁脱落,甚至死亡。不同的污染物对细胞的影响也有差别,有的影响是长期、缓慢和潜在的,而有的则能在很短的时间内抑制细胞生长或产生有毒物质杀害细胞。根据污染源不同主要可以分为:生物性污染、化学性污染、物理性污染和气溶胶污染。  生物性污染:这是最常见也是危害最大的污染。如细菌、病毒、真菌,支原体等。这些污染源有可能是人为带入,或是细胞在放入培养箱前已经受污染,再或者是箱体本身没有消毒干净。体外培养的细胞自身没有抵抗污染的能力,而培养基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而细胞微生物污染一旦发生往往是无法挽救的。 :培养箱中许多化学物质都可以引起细胞污染。如细胞培养容器清洗过程中残留的洗涤剂、加湿器中未纯化的水、人为带入的液体或气体都可能成为化学性污染的来源。不同化学物质对细胞污染是不一样的,有的可能促进或抑制细胞生长,有的甚至杀死细胞。  物理性污染:培养环境中的物理因素,如温度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光)会对细胞产生影响。物理性污染常常被人们所忽视或被笼统地归为化学性污染,其主要是在代谢水平或分子水平上,影响细胞正常的生理过程。 :气溶胶是液体或固体微粒均匀地悬浮在气体介质中的分散体系,当微粒是微生物时,就是微生物气溶胶,如果这种微生物是病原性的,就是病原微生物气溶胶。细菌、病毒等病原体通过气溶胶可在人与人、人与环境之间传播。微生物气溶胶可分为两大类:一类是飞沫核气溶胶,另一类是粉尘气溶胶。医学实验室内许多操作都可以产生气溶胶,并且大多可能是病原微生物形成的感染性气溶胶,由于其气溶胶分子小,漂浮在空气中、粘附于人身上,易在空气中扩散而污染实验室的空气。 2、CO2培养箱污染防控措施 :二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生,其主要是防污染设计和消毒灭菌系统的改进,以达到消毒灭菌的目的。如带有紫外消毒功能的CO2培养箱、带HEPA过滤器的CO2培养箱,以及带高温消毒的CO2培养箱等,后者又分为高温干热和高温湿热两类。这些装置的灭菌能力各有千秋,紫外灯消毒范围有限,距离灯越远,消毒能力越差。HEPA过滤器的过滤膜孔径有限,无法去除病毒和一些微小细菌,并且容易损耗,也有其局限性。相比而言,高温消毒则是比较有效的方法。而高温干热和高温湿热也有所不同