白色链霉菌JA3453中垩唑霉素生物合成基因簇调节基因的中断研究.pdf.pdf

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第卷第期上海交通大学学报农业科学版..
年月.

文章编号:———
白色链霉菌中垩唑霉素
生物合成基因簇调节基因的中断研究
宋丹凤,赵春华,邓子新.
上海交通大学生命科学技术学院,教育部代谢工程重点实验室,上海
摘要:通过生物信息学分析,在白色链霉菌菌株的垩唑霉素生物合成基因簇中定位了个调节基因。其中个是属
于家族的调控因子编码基因,另个为编码转录激活因子基因。为了研究这个调节基因的功能,选用垩唑
霉素的产生菌链霉菌为实验材料,采用目标的方法,对调节基因和分别进行基因中断。分
,的中断则没有对垩唑霉素的产量带来明显影响。这些结论为利用调节基、
因提高垩唑霉素的产量提供了可能。
关键词:目标;调节基因;基因中断;垩唑霉素
中图分类号: ‘文献标识码:


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链霉菌属于原核生物界放线菌目链霉菌科,是蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶等。
土壤中主要的微生物类群之一。链霉菌产生了大约垩唑霉素,及其相关化合物
种以上的抗生素。由链霉菌产生的抗生素占是由一些链霉菌产生的抗生素。其中垩唑霉素是由
自然界已知抗生素的%回,
念菌素、红霉素、四环素、卡那霉素、链霉素等、植物的,其结构特征为螺旋链接的一内酯/一内酰***,垩
保护如春日霉素、井岗霉素、庆丰霉素等和促进动唑环,,二烯和一个,,三烯链,这一特别结
物生长如莫能菌素、泰乐星等方面得到了广泛的构为我们提供了就其独一无二的结构特征发现新的
应用。此外,链霉菌还产生许多具有很好的医用价值生化机制的机会。同时,
的胞外酶,如胆固醇氧化酶、磷脂酶、葡萄糖异构酶、具有抗肿瘤、抗病毒和有限的抗菌活性凹,这也揭色
收稿日期:
、作者简介:宋丹凤一,女,硕士研究生,研究方向:抗生素的分子生物学,—:..;
邓子新为本文通讯作者。:... 。
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上海交通大学学报农业科学版第卷
链霉菌的基因组文库中成功克隆了甲氧丙心收集孢子并重新悬浮于适量的无菌水中,在混合
二酰合成位点,然后定位了完整的垩唑霉素合器上振荡打散孢子,按:之比与大肠杆菌细胞等
成基因簇圈,并对之进行了测序。,—后使用抗生
***酸的无菌水进行覆盖,放于℃
验利用目标方法,分别对这个基因进行中断培养即可看到接合转移子。
从而得到了突变株和.—分析显. 突变株的构建和验证
,—为了检测和在垩唑霉素生物合成
则没有显著影响,这对以后开展组合生物合成中所发挥的作用,首先通过靶向系统
的研究奠定了基础。包括入一和重组系统的基因置换方法分
别在和中插入壮观霉素抗性基因—
实验材料与方法从而实现基因中断。
‘首先,依据系统的基本原理,按照
. 菌株的序列,我们设计了如下寡核苷酸引物:
—
菌株白色链霉菌来源于德国’
研究所的所惠赠, ’
系统包括入