毛囊重建实验及研究.pdf

毛囊重建的实验研究硕士研究生:侯春指导教师:胡志奇教授摘要研究背景毛发中的毛囊结构是一个非常有意义的亚器官,不仅它的缺失会给病人带是***有此特征的唯一器官。它对研究上皮与中胚层起源细胞之间的相互作用,说都是极好的模型。毛囊毛发的再生研究不但将给需要毛发移植的患者带来福观更趋自然美观,在临床上得到了广泛应用。毛发移植的过程,包括移植物的制备,受区麻醉,受区的准备及植入几个阶段,由于毛发的供区范围有限,密度较大及该区毛囊单位特殊性的限制,切割毛囊的困难较大,虽经历了近半个世纪的发展,但在制备毛发移植外科方面仍有较大的进步和发展。毛发移植中毛发的供区有限以及手术过程中毛囊单位的损失率较高,限制了毛发移植的广泛应用,成了现代毛发移植外科进步的瓶颈,同时手术时间也比较长,在一定程度上影响了手术效果。最早人们是利用游离的毛囊细胞重建毛囊而获得成功。等将从新生小鼠上游离下来的毛囊,不培养或进行培养后与真皮成纤维细胞混合移植于裸鼠背部,周后发现裸鼠背部长出了浓密的毛发。等在此基础上进一步对毛发生长时所需的细胞成分进行了研究,他们发现新鲜的真皮细胞能诱导毛囊芽悬液重建毛囊,毛囊芽单独移植或与培养过硕士学位论文来很大的痛苦,而且自身也呈周期性,有规律地自我再生,在人体内终生不断,器官和组织再生,色素形成,伤口愈合及皮肤癌的发病机制等重要生命过程来音,更将对组织工程和细胞再生领域产生极大的影响。毛发移植从年亩锸笛榭J贾两瘢丫私礁鍪纪。年,这项技术由美国学者提出毛发供区理论后开始逐渐成熟,年美国的教授提出了毛囊单位移植概念,使得移植后的毛发外.
的真皮细胞联合移植虽能构建出皮肤,但不能产生毛发。而游离的成熟毛囊可以在移植部位产生毛发,不需要另外的真皮成分。在实验中他们还发现经过培养后的大鼠触须毛乳头细胞仍具有诱导毛发形成的能力。因此认为成熟毛囊本身即含有毛囊形成所需的成分,而培养过的真皮细胞不能诱导毛囊芽产生毛发可能是因为其缺乏毛乳头细胞所致。等对毛囊形成的诱导机制进行了研究,间相互作用也能诱导毛囊的形成,二者具有相似的机制。悦蚁赴蟹掷耄嘌⒋ù范苡盏汲雒业闹掷和以及证实其诱导出新的毛囊并长出毛发的可行性。页鲆恢掷硐氲闹Ъ芑蚝铣煞椒ǎ迪置抑亟ǎ⒔幸焯钪漳康氖窃谑笛槊抑亟ǎ浦苍诼闶笊砩系氖笛榈耐保实验各种移植方法,探索出一种效率较高效果较好的实验方法,为临床上找到一种既高效效果又好的治疗秃发的方法打下坚实的基础。研究方法酶消化小时,吹打后加’豪胄模痬,取上清液液留取沉淀物,。嗣蚁赴橹旌衔锏闹谱鳌=菲け瓯居米岳此逑床⑻蘧煌贩ⅲ.疞乙醇擦拭椋晕蘧鶧’河孟狙浪⒎锤此⑾幢瓯遍勘榫挥梦蘧髅;剪除标本边缘部分。以下步骤均在无菌条件下进行。⒕槐瓯局糜诩蛞资质跆ㄉ希眉舻栋虢钅ぁ将标本剪成中文摘要他们认为胚胎期毛囊的形成是真皮和表皮相互作用所致,出生后真表皮细胞之研究目的或异种毛发移植实验。竺蚁赴橹旌衔锏闹谱鳌=***的乳鼠剥去皮肤剪碎,用ソ涸保留,剩下的沉淀物在胰酶中。偌尤隓疭液吹打离心/〉纳锨逡汉显谝黄穑倮胄/,倒掉上清Ⅱ
訢’航橹次,镊子挤出残留的毛干,弃之。脂肪组织剪成米粒样大小,以%胶原酶嫦钡街咀橹消化成液体状。褐屑尤氲攘緿‘汉笠迫肜胄墓芾胍恍痬×锨逡海恋砑次C橥罚ǚⅲ宋橹渌赴煞值幕旌物。ǔ恋砦镆迫肫矫笾杏肈’悍锤雌矗渲型绲拇罅棵头及其他细胞成分洗下,毛发及纤维组织弃之。嗣蚁赴旌衔镆迫离心管离心,痬,共次,弃上清液,目的在于去除残留的胶触须毛乳头细胞,观察其在体外培养的形态学和生物学特点。大鼠麻醉后修剪小时,间断吹打使毛乳头游离,静置使毛干沉入管底,吸出上清,经可竺蚁赴橹旌衔胶原凝胶移植。如上所述,分别获得鼠毛囊组织混合物,然后将这些组织混合物加上胶原凝胶,加入培养液,放在温箱里培养后,将混合物一起移植到裸鼠上培养。抑亟ǖ姆椒āB闶笃は伦⑸浞掷氲拿腋春献橹海直鹪、,再将皮条从真皮一皮下脂肪层交界处剪开。将脂肪层组织置于%分离酶中,约籰蝗缓笤儆嫦原酶。笫蟠バ朊橥废赴掷搿⑴嘌2捎萌蚁ê拖晕⒔馄史ǚ掷颊侧被毛,常规消毒后剪去全层皮肤,暴露其下方的触须毛囊,然后用镊子将其完整拔出,置离心管中,在℃缓慢搅拌的条件下加入%胶原酶网过滤后收集截留的毛乳头。显微解剖法参照文献中的操作进行。旌蠼凶橹衅研究结果操作的难度,得到了毛囊样结构。硕士学位论文
探索。结构。捎肈细胞结合毛囊细胞组织混合物的方法来移植,又得到了毛囊样结构,从切片效果来看,要好于单纯的毛囊细胞组织混合物。⒃谑竺蚁赴橹旌衔锏奶剿髦校赜诿以偕婕暗搅嗣业纳掀び间质之间的相互作用,这项研究强调了在毛囊传代和表皮角质化细胞分化潜力中,上皮