实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术.ppt

。,增强微生物细胞大小的感性认识。二、,由四条槽构成三个平台,中间较宽的又被一短的横槽隔成两半,每边平台上刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数室。每个大方格边长为1mm,盖上盖玻片后,,(1×10-4ml)。计数时通常统计5个中方格的细菌数,再换算成1ml菌液中的细菌数。。镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般是将1mm分为100格,(即10μm),用于校正目镜测微尺每格的相对长度。目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片,其中央有精确的等分刻度,分50和100两种,通过镜台测微尺校正后,可用于测量细菌的大小。,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,枯草芽孢杆菌等。,显微镜,盖玻片,载玻片,目镜测微尺,镜台测微尺,无菌毛细滴管等。,在计数室上面加盖血盖片。取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡。用10×镜观察并将计数室移至视野中央。在10×镜下计数:计数4个(或5个)中格的平均值,然后求得每个中格的平均值。乘上16(或25)就得出计数区总菌数,最后再换算到每mL菌液中的含菌数。注意事项:计上不计下,计左不计右。测定的工具:目镜测微尺镜台测微尺目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍数而改变,也会因使用不同的显微镜而产生误差,因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。1)目镜测微尺的校正:在10×镜下,看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动载物台,使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合,然后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10µm,所以可得目尺每格长度(µm)=(台尺格数×10)/目尺格数(10×10/60)2)菌体大小的测定:制作一片酵母菌的盖片,取下镜台测微尺,将盖片置于载物台上,然后在40×镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。:40×镜下倍目镜测微尺每格长度是μm。菌号酵母的直径大小测定结果目镜测微尺格数实际直径/µm12345均值