三糖铁（TSI）琼脂试验的原理.doc

三糖铁(TSI)琼脂试验的原理试验方法:以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物,穿刺接种并涂布于斜面,置36±1℃培养18~24h,观察结果。三糖铁琼脂(TSI)成分: 牛肉膏 葡萄糖 硫酸亚铁铵(含6个结晶水) ***化钠 硫代硫酸钠 除酚红和琼脂外,将其他成分加入400mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解,±。另将琼脂加入600mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解。将上述两溶液混合均匀后,再加入酚红指示剂,混匀,分装试管(12mm×100mm),每管约2~4mL,高压灭菌121℃10min或115℃15min,灭菌后置成高层斜面,呈桔红色。原理分析:本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观察细菌对糖的利用和硫化氢(变黑)的产生。该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1,只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。而发酵乳糖的细菌(),则产生大量的酸,使整个培养基呈现黄色。如培养基接种后产生黑色沉淀,是因为某些细菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢和培养基中的铁盐反应,生成黑色的硫化亚铁沉淀。提问:志贺氏菌都能分解葡萄糖,产酸不产气,大多不发酵乳糖,不产生H2S。应该产生什么现象? 大肠杆菌,能分解葡萄糖产酸产气,大多数能分解乳糖,不产生H2S。应该是什么现象? 沙门氏菌,能分解葡萄糖,不发酵乳糖,大多数产生H2S,多数产气。下面照片所示2-3-4,可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏菌?答案:2-志贺氏菌 3-沙门氏菌 4-大肠杆菌