无缝克隆.doc

实用标准文案:..2012分子生物学创新产品GBI无缝克隆技术GBIDirectPCR技术 高效转染试剂高端生物技术服务上海诺晶生物科技有限公司无缝克隆试剂盒---全新重组技术将目标DN***段精准插入载体!---突破传统,无需内切酶和连接酶!---省钱省时,分子实验室的必备!GBI无缝克隆和组装技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法。传统的PCR产物克隆方法主要有两种:一种是PCR引物设计时引入载体上的酶切位点,PCR产经双酶切后定向克隆到目的载体上;另一种是TA载体连接。这两种方法费时费力,过程繁冗。无缝克隆和组装技术旨在克服上述缺陷,它可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA的片段的插入,而不需要任何限制性内切酶和连接酶。它可以为您解决克隆,片段组装,突变方面的技术困扰,提高您的工作效率,让您的工作变得轻松高效。技术特点*位点选择灵活:载体任意位置基因克隆*快速简便:30分钟完成载体构建*精确:不需要增加任何额外的程序*克隆效率高:高达90%阳性克隆应用:*片段克隆,片断组装,突变构建*基因表达,沉默,小RNA等功能研究*蛋白质突变研究*应用合成生物学*代谢工程,菌株改造无缝克隆技术原理GBI无缝克隆技术只要插入的DN***段末端与载体末端具有15-20个同源碱基序列就可以在载体的任意位点完成克隆重组。这种无缝克隆技术可灵活地将多个DN***段组合成具有更多功能的DNA分子,可广泛应用于功能基因组学,蛋白功能研究,合成生物学,基因组改造等领域。GBclonart无缝克隆操作过程:。***段的PCR扩增(引物设计见说明书)。***段和线性化载体以摩尔比2:1加到试管中进行重组反应:————℃孵育30分种,然后转移到冰上。。 *使用基因定点突变试剂盒,只需要在突变位点如下图增加两条正反的引物,分别和线性化载体两端的对应引物配对,进行两个PCR片段的扩增,然后使用GBI的突变试剂盒将2个PCR产物和线性化载体在同一反应体系中进行进行重组反应,即可将点突变构建到目的片段上。*利用无缝组装试剂盒,可以将多个PCR片段进行连接,并构建到目标载体上,形成长片段的DN***段。该试剂盒在合成生物学上有广泛而重要的作用。无缝组装试剂盒原理*GBclonart引物设计方法GBclonart基因克隆的引物设计及目的DN***段的扩增,与常规PCR法是相同的。唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基,由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基。举例如下:订购信息货号描述规格价格(元)GB2001-24GBclonart无缝克隆试剂盒24个反应1600GB2001-48GBclonart无缝克隆试剂盒48个反应3000GB2002-24GBclonart无缝组装试剂盒24个反应3200GB2002-48GBclonart无缝组装试剂