大鼠痛风造模.doc

大鼠尿酸钠结晶急性痛风性踝关节炎模型【模型制作】Wistar成年大鼠,体重250-300 g,雄性。(1)制备MSU结晶:将1mol/L的NaOH5ml和尿酸钠800mg加入155ml去热源。注射用水煮沸溶解,自然降温,,溶液呈乳白色后立即离心,将上清反复离心至晶体不再析出,4℃冷却1h后离心收集晶体。临用前将MSU晶体用PBS配成所需浓度。(2)造模方法:大鼠腹腔注射戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉,选右踝关节外侧后方为穿刺点,针口斜面朝前上方与胫骨成45°夹角穿入踝关节腔,,以关节囊对侧鼓起为注入标准,诱导急性关节炎模型。相应地,MSU溶剂对照组注射等体积的PBS。【观测指标与分析】(1)关节炎症、肿胀和关节功能障碍指数:①炎症指数分级标准:0正常;1关节皮肤红斑,轻度肿胀,骨性标志可见;2关节明显红肿,骨性标志消失,但肿胀局限于关节部位;3关节以外肢体肿胀;②肿胀指数定义:通过2~3mm宽纸条和游标卡尺测量实验前和诱导炎症后不同时间的关节周径,关节肿胀指数=(测定时点关节周径-初始周径)/初始周径;③功能障碍指数分级标准:0正常步态,双足均匀着地;1足着地减轻,足趾未展开,轻度跛行;2足屈起,趾背着地,明显跛行;3足完全离地,三足步态。观察表明大鼠踝关节内注入足够量的MSU晶体可100%迅速诱导急性关节炎。关节局部出现红斑、肿胀伴功能障碍。炎症高峰期肢体严重红肿,关节部位皮肤温度增高,活动明显减少,行走表现为三足步态。(2)MSU注入量与关节炎性变化在注射后10h内有剂量依赖关系:MSU在5~20mg/ml范围内,关节红肿和功能障碍严重程度呈剂量依赖性增加,20mg/mL注入2h后可迅速诱发关节红肿和功能障碍,4h症状明显,8~12h达高峰,24h后减轻,5~6d消失;关节腔内注射MSU后出现明显积液及纤维渗出伴大量以中性粒细胞为主的炎性细胞浸润,组织严重水肿,滑膜及其周围组织亦有大量炎性细胞浸润。注入量超过20mg/ml后,关节炎症严重程度虽不再增加,但持续时间明显延长,并可见关节腔内MSU晶体被大量蛋白样物质和炎性细胞包裹成团状。该模型改进MSU晶体制备方法,提高了实验可重复性,成功地诱导典型的大鼠急性关节炎,是较好模拟人急性痛风性关节炎病变特点的大鼠模型。