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微生物学杂志年月第卷第期..
体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞方向分化
胡晶,牟玲,罗恩杰
.中国医科大学病原生物学教研室,辽宁沈阳;.沈阳市传染病医院,辽宁沈阳
摘要探讨成纤维生长因子在体外定向诱导大鼠骨髓问充质干细胞—向肝细胞样细胞
分化的作用及量化关系。体外分离培养大鼠—,将第代—采用不同剂量的诱导。诱
导后,在显微镜下观察细胞形态学的改变;用免疫细胞化学法检测白蛋白和的分泌; 染色法检测糖
原的分泌。诱导后由梭形向多角形、卵圆形方向变化,白蛋白、和糖原即有阳性表达,以
后随着诱导时问的延长阳性率逐渐升高。/诱导比/诱导细胞白蛋白、和
糖原的表达量均多。/具有较强的诱导向肝细胞样细胞分化的能力。
关键词骨髓间充质干细胞;成纤维生长因子一;肝细胞样细胞
中图分类号文献标识码文章编号——一
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近年来,肝硬化的发病率和病死率逐渐升高, ,具有多向分化潜能,在一定条件
其中以病毒性肝炎所致的肝硬化最为常见。迄下可定向分化为肝细胞¨,有望成为治疗终末期
今,对于本病的治疗尚无良策,主要是采用对症疗肝病的一种新型种子细胞。然而,适宜的诱导剂
法,疗效不佳。
肝病的有效方法,但由于供体来源受限,因而限制清楚。体内研究表明成纤维生长因子..
了临床肝移植研究的进展。近期研究发现,骨髓一,有促进骨髓间充质细
间充质干细胞胞向肝细胞方向分化的作用“。但是体内诱导
收稿期:一一
作者简介:胡晶女,硕士研究生。研究方向为骨髓间充质干细胞体外诱导培养。
通讯作者’
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期胡晶等:体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞方向分化
效率低,不易控制。—在体外容易分离、每隔换液次,收集诱导后、、的
纯化,如果能大量诱导培养成肝细胞,可为肝的组细胞爬片,至一保存。
织工程提供充足、合适的细胞来源。本实验以此.. 细胞形态学观察加入各种诱导成分后,
为目的,在体外分离培养—的基础上,采每天用倒置显微镜观察每组细胞形态学的改变并
用不同剂量的一进行体外诱导,观察生长因且照相。
子的量与诱导分化的量化关系,为—临床.. 免疫细胞化学检测和将诱
治疗肝硬化的可行性提供实验依据。导后、、留取的细胞爬片,冲遍,无
水乙醇固定细胞爬片,蒸馏水冲洗,参照
材料与方法
试剂盒说明书进行免疫细胞化学染色。山羊抗
. 材料:稀释,兔抗:稀释,
大鼠雄性,体重—,由中国医二抗为工作液。显色,苏木素复染,常规脱
科大学实验动物中心提供。—培养液购自水,透明,中性树胶封片,镜下观察,计数阳性率。
美国公司。胎牛血清购自中国医学科学院.. 染色检测糖原分泌将诱导后、
生物工程研究所。购自。、留取的细胞爬片用冲洗遍,无水
兔抗抗体购自武汉博士德生物工程有限公乙醇固定细胞爬片,蒸馏水冲洗;加% 高
司。山羊抗抗体购自公司。碘酸氧化液,蒸馏水洗次;加液于
免疫组织化学试剂盒购自美国公司。暗处加