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第三军医大学硕士学位论文
自体移植脾组织神经再生的实验研究

摘要

目的观测自体脾组织大网膜内移植后 GAP-43+神经的再生过程 GAP-43 NGF
TrkA 的表达和移植后脾组织结构重建的动态变化规律探讨自体移植脾组织的神经再
生规律神经再生与结构重建及神经再生与 NGF 及其特异性受体 TrkA 的关系为脾
脏创伤后自体移植的实验研究和临床应用提供理论参考依据
方法建立自体脾组织大网膜内移植动物模型分别于术后 7 14 30 60 90
120 180 d取脾组织观测(以假手术组为对照) (1)光镜电镜观察自体移植后脾组织
的形态学变化过程(2)应用免疫组织化学抗 GAP-43 抗体方法观测自体移植脾组织
中不同时相点 GAP-43+神经纤维变化并采用图像分析测定神经纤维面积密度(3)采
用组织原位杂交技术观测自体移植术后不同时相点脾组织中 GAP-43 NGF TrkA
mRNA (4)应用 RT-PCR 技术方法采用凝胶图像分析仪测定自体脾组织移植后
GAP-43 NGF TrkA mRNA 的含量的动态变化
结果(1)自体脾组织移植后经过坏死再生和重建于术后 14 d 出现细胞再生
术后 60-90 d 初步形成脾组织结构术后 120-180 d 基本恢复正常结构(2)免疫组织化
学方法可见自体脾组织移植术后 7-14 d 移植脾组织中未见 GAP-43+神经纤维术后
30 d 周围大网膜中可见少量 GAP-43+纤维并向移植脾组织内伸展术后 60-120 d
移植脾组织中 GAP-43+神经纤维逐渐增多术后 180 d 移植脾组织中 GAP-43+神经纤
维接近正常脾组织但密度仍较正常脾组织低(3)组织原位杂交方法可见正常脾组织
有少量 GAP-43 NFG 和 TrkA mRNA 的表达移植术后 30-90 d 移植脾组织中出现
GAP-43 NGF TrkA mRNA 并逐渐达到高峰且各时相点 mRNA 的表达均明显高于
对照组(4)RT-PCR 方法可见自体脾组织移植后 30-90 d 移植脾组织中出现 NGF 和
TrkA mRNA 并逐渐增高到峰值伴随着 NGF 和 TrkA 的表达 GAP-43 mRNA 也表现
出相同的表达规律术后 120-180 d 各时相点 mRNA 表达均逐渐下降至对照组水平
结论(1) 自体移植脾组织中存在 GAP-43+神经纤维再生其再生规律与移植脾
组织的其它神经再生相似(2)神经再生来源于包裹移植脾组织的大网膜(3)神经再生
进程与脾组织结构的恢复过程基本同步提示自体移植术后脾组织的再生和重建过程
依赖于移植脾组织的神经再生(4)神经再生过程中伴随着 NGF 和 TrkA 的高表达
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且表达规律与神经再生规律一致证实了 NGF 和 TrkA 对自体脾组织移植后神经再生
的促进作用(5)自体脾组织大网膜内移植后能够部分地恢复脾组织结构提示自体脾
组织移植是一种有效的脾移植手术方式

关键词自体脾移植神经再生 GAP-43 NGF TrkA 大鼠
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Experimental study on the nerve regeneration during
splenic autotransplantation of rats


Abstract


Objectives: To investigate the process of the regeneration of GAP-43+ nerve fibers, the
expressional regularity of GAP-43 NGF TrkA mRNA and reconstruction of the spleen
tissues during splenic autotransplantation into the greater omentum, and explore the
regularity of nerve regeneration ,and the relationship between nerve regeneration and tissues
reconstruction and the one between nerve regeneration and NGF TrkA.
Methods: Healthy Wistar rats were randomly divided into two groups: (1) the
experimental group