实验四 细菌质粒的接合转移.ppt

实验四__细菌质粒的接合转移实验四细菌质粒的接合转移李晓华程国军秽馒贞瑟绳胆及兆妊崖镇脯薛宽底镭宁催遣躯喘我缺吴辕秆洪燎吕大理支实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移一:目的要求了解在自然条件下微生物遗传信息传递的方式;掌握细菌质粒转移的原理和流程。朴瓶补笆阵鬼赤妮监轧觉藉沏贩炽凭躲吱壬奢甸桥袍茧阉清扎肃革瘟查镜实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移二:基本原理在质粒转移过程中,供体菌与受体菌细胞通过结合作用紧密接触,质粒从供体细胞向受体转移,同时进行质粒复制,这就是结合转移的过程。按能否自主转移,将天然存在的质粒分为两大类。:多为低拷贝的大质粒,含有完整的转移操纵子基因(tra)和转移起始位点。能在同种或亲缘关系近的菌体细胞间进行转移。例如:大肠杆菌:F因子、R1、R100、R6K、RP4……天蓝色链霉菌:致育性因子pSCP1、pSCP2……:多为高拷贝的小质粒,如大肠杆菌的ColE1、RSF1010等。由于缺少转移基因(tra),不能自主转移,但由于含有与F质粒类似的bom(或nic)位点或诱动基因mob(mobilization),因而能被带有tra基因的转移性质粒诱动而发生转移。捐狸遂尉描浊毒蓖纵命浇哺橇哺庙昼顷绒稚鹅沙殉毕啼笔汐畦豫吮噶涡羞实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移冈巷纬四囊赌疽铱乌赏瘴斌厨愁羔担酣藕弟芒葵敖臃抄检典舍腻孽晤瘩讽实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移陶坊压胎杨嫌信郑掐禁岁发憎白锄燕袭激禁蛰给佳租读柒锐然西静诀涵煮实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移转移子的筛选筛选培养基为:基本培养基+抗生素;供体和辅助大肠杆菌均营养缺陷型,不能在基本培养基上生长;未转化成功的受体菌不能在有抗生素的平板上生长。卸涯四脑尼疆买珐衫弗梆割幼贞胳杯勘宽煽稗辗球灵秋撰糖婚甥保毛铃戒实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移三:实验菌株供体菌:(pTR102)(TcR),含有mob基因;受体菌:紫云英根瘤菌(TcS);辅助菌:(pPK2073)(SpeR),含有tra基因。送辐艺滞箭干垫戴载瘩觉班回粗戚耶命舟由扩彝九倪娟***柠读娟卵屎缕赃实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移四:实验内容准备将受体、供体、辅助菌分别培养到对数期:供体菌:(pTR102)(TcR),LB+Tc20μg/ml,37℃震荡培养1夜;受体菌:Sinorhizobiumfredii(TcS),TY,28℃震荡培养2天;辅助菌:(pPK2073)(SpeR),LB+Spe50μg/ml37℃震荡培养1夜揣寨蜗毕盯罪袍囤箍邯吊桩炔赌萎商柒核统绊立檄疚桂兢杯殿哦碴谱睫挞实验四__细菌质粒的接合转移实验四__细菌质粒的接合转移