复旦大学分析化学AII第十章液相色谱讲述.ppt

*第21章液相色谱分析法*:扩散系数Dm液/Dm气=10-5速率方程H=A+B/v+CvA(涡流扩散项)∝dpB(分子扩散项)忽略不计C(传质阻力项)∝dp2v∝1/dp*填充柱气相色谱柱,填料尺为80-100目(2毫米);高效液相色谱的固定相粒度在2-10微米,因此需要很高的反压。高效液相色谱(HPLC)又称为:高速液相HSLC高压液相HPLC高分辨液相HRLC*HPLCGC分析对象70%-80%化合物20-30%气体和无机、有机流动相液体(与组分有作用)气体(化学惰性)柱温低温、室温高温流动相产生高压泵+贮液瓶高压钢瓶进样进样器直接进样柱形直型螺旋型载体粒子2-10um2mm柱长10cm-25cm>1m高压液相色谱与气相色谱的比较**featureofHPLC特点:高压、高效、高速高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。*:固体吸附剂,如硅胶、氧化铝等。流动相:各种不同极性的一元或多元溶剂。基本原理:组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸;吸附色谱对中等分子量的油溶性样品可获得最佳的分离,适用于异构体分离和同系物分离;而对强极性或离子型的样品,有时会发生不可逆吸附,不能得到满意的结果。缺点:非线形等温吸附常引起峰的拖尾;-固吸附色谱liquid-solidadsorptionchromatography*(极性大小):烃<--------<羧酸,:吸附剂的活性↑大,对被测组分的吸附能力↑强强极性物质——选择弱吸附剂(固体固定相)弱极性物质——选择强吸附剂(固体固定相):“相似相溶”原则基本原则是极性大的试样用极性较强的流动相,极性小的则用低极性流动相。吸附剂和流动相的选择:依据被测组分、吸附剂和流动相的性质*极性吸附剂上有机化合物的保留顺序如下(极性强保留时间长):***碳化合物<饱和烃<烯烃<芳烃<有机卤化物<醚<硝基化合物<***<叔***<酯醛***<醇<伯***<酰***<羧酸<磺酸*-液分配色谱liquid-liquidpartitionchromatography固定相与流动相均为液体(互不相溶);基本原理:组分在固定相和流动相上的分配;流动相:正相色谱(normalphase):流动相极性比固定相极性小反相色谱(reversephase):流动相极性比固定相极性大固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采用;化学键合固定相:(将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。C-18柱(反相柱)。