高中生物实验总结.doc

:利用***绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布;***绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同:***绿+DNA→绿色吡罗红+RNA→:真核生物DNA主要分布在细胞核中;线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。:细胞核呈绿色,:DNA主要分布在细胞核中;RNA主要分布在细胞质中;:(1)取口腔上皮细胞制片:①载玻片上滴一滴质量分数为:%NaCl溶液;②漱口后,用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下;③载玻片在酒精灯上烘干,盖上;(2)水解:①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中;②大烧杯中加入30℃温水;③将小烧杯放入大烧杯中保温5min;(3)冲洗涂片:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s;(4)染色:①吸水纸吸去载玻片的水分;②滴两滴混合染液,染色5min;③吸去多余的染液,盖上盖玻片;(5)观察:先低倍后高倍;6、几种液体在实验中的作用:(1)%NaCl溶液:保持口腔上皮的正常形态。8%的HCl:①改变细胞膜等的通透性;②使染色质中的DNA与蛋白质分开。蒸馏水:配置染液;冲洗载玻片。(2)混合染液需要现配现用;(3)该实验不宜用深色的材料,避免颜色对实验的干扰。实验二、物质鉴定一、实验原理:还原糖+斐林试剂~砖红色沉淀(水浴加热)脂肪+苏丹III~橘黄色(滴液观察或制片显微镜观察)脂肪+苏丹IV~红色蛋白质+双缩脲试剂~紫色反应(不加热)1、还原糖的检测(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如:苹果,梨,白萝卜。(2)试剂:斐林试剂(甲液:,乙液:),现配现用。(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。,向试管内注入2mL组织样液。  ,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂; 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无CuOH生成。-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)也可用酒精灯对试管直接加热。 缩短实验时间。★模拟尿糖的检测1、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸3、结果:试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。4、分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。2、脂肪的检测(1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。(2)步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央↓染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)↓制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)↓镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)操作方法注意问题解释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片;浸泡时间过长,组织较软,切片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。3、蛋白质的检测(1)试剂:双缩脲试剂(A液: