多效唑人工田园居抗原的合成及鉴定.doc

多效唑人工田园居抗原的合成及鉴定.doc多效唑人工田园居抗原的合成及鉴定张宏梁,李宏梁*(中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083)摘要:本研究通过琥珀酸酐法、5-溴戊酸法、威廉森合成法,在多效唑羟基位点引入末端带有羧基的连接臂,合成三种不同结构与人天体浴的多效唑半抗原。采用混合酸酐法分别将三种半抗原与牛血清蛋白(BSA)连接,合成多效唑人工免疫原。紫外全波长扫描鉴定显示:人工包被原合成成功,偶联比分别是:29:1、42:1、26:1。将琥珀酸酐法、5-溴戊酸法合成半抗原与卵清蛋白(OVA)相偶联,测得偶联比分别是:9:1、20:1,人工免疫原合成成功。关键词:多效唑;半抗原;人工免疫原;人工包被原SynthesisandidentificationofartificialantigensofpaclobutrozalDaiCaixia,已修改HeJiguo*(CollegeofFoodScienceandNutritionalEngineering,ChinaAgriculturalUniversity,100083)Abstract:inicanhydride,5-(BSA)-:1、42:1、26:-Bromovalericacidmethodwereconjugationtoovalbumin(OVA)forcoatingantigens,theconjugationratiowasabout9:1、20::Paclobutrazol;hapten;artificialimmunogen;coatingantigen引言多效唑(Paclobutrazol,又名MET)是一种高效低毒、应用广泛的植物生长延缓剂和光谱性杀虫剂[1,2],其分子结构如图1所示。在多效唑的分子上,没有和蛋白质偶联的基团,需要进行活化或借助Linker与蛋白质相连。文献报道,人工抗原的免疫效果因半抗原修饰中连接臂的长短和结构不同而发生变化[3,4];且用于制备包被原的半抗原修饰物与制备免疫原的半抗原结构差异越大,抗体与包被原的亲和力越弱,越有可能建立具有高灵敏度的测定小分子的间接抑制免疫分析方法[5,6]。因此实验研究了采用不同的活化方法,在多效唑羟基位点引入三个不同长短和结构的连接臂,以探讨半抗原结构对多效唑人工抗原免疫效果的影响,并为建立多效唑高灵敏度免疫监测方法提供理论依据和实验材料。:多效唑(原料药,>96%);氢化钠、琥珀酸酐、一***乙酸、5-溴戊酸,均购自国药集团、***甲酸异丁酯为AlfaAesar进口原装;牛血清白蛋白(BSA);卵清蛋白(OVA,)其余试剂均为国产分析纯。:FA100