重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）单克隆抗体的制备及鉴定.pdf.pdf

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张淑芹梁重阳刘志屹戴璐张福明②孙非③吉林大学再生医学科学研究所,长春
中国图书分类号. 文献标识码文章编号
摘要目的:制备重组灵芝免疫调节蛋白一单克隆抗体,为的药效学及药代动力学研究奠定基础。方
法:以纯度%的一免疫/小鼠;
胞株;采用小鼠腹腔接种法制备腹水;亲和层析柱在纯化仪上对抗体进行纯化;间接方法测
定单克隆抗体的效价;胶片曝光方法对一单克隆抗体特异性进行分析。结果:筛选出株可特异性分泌抗
单克隆抗体的杂交瘤细胞株。分别命名为和。其抗体亚型分别为亚型和亚型。腹水
抗体效价分别为:和:,细胞培养上清效价分别为:和:。检测证明这两株杂交瘤细胞
所分泌的单克隆抗体均具有良好的特异性。结论:。
关键词重组灵芝免疫调节蛋白;细胞融合;单克隆抗体;效价

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真菌灵芝免疫调节蛋白一是年究奠定基础。
等人从赤灵芝子实体中分离提取出的第一种真菌免
材料与方法
疫调节蛋白,是由个氨基酸组成,分子量.
,具有很强的免疫调节作用。本课题组将. 主要药品和试剂重组灵芝免疫调节蛋白
的重组基因转移到酵母表达系统中获得了重组表,本室提供; 细胞培养液、次黄
达,制备出重组灵芝免疫调节蛋白,并嘌呤、甲氨蝶呤、胸腺嘧啶核苷,公司,美国;
进行相关的药效学研究。由于一的单克隆抗体羊抗兔辣根过氧化物—、弗氏完全佐剂
的制备至今未见报道,本文拟应用杂交瘤技术制备、弗式不完全佐剂、、邻苯二
,为一药效学的深入研***、抗体亚类鉴定试剂盒,公司,美国;牛血
清白蛋白,公司,美国。
①. 主要仪器酶标仪,;低温冰箱,,
②吉林大学第一医院,长春美国;紫外可见分光光度计,尤尼克斯;岛津高效液
③通讯作者,.:..
相色谱仪,日本;蛋白质纯化仪,,美国;凝
作者简介:张淑芹年一,女,高级工程师,主要从事分子生物
学研究,:..。胶成像仪,天能科学仪器有限公司;电泳仪、半干转
膜仪,美国公司。
中国免疫学杂志年第卷
. 细胞株及动物/鼠骨髓瘤细胞,吉林透析,以获得适当的和离子强度,然后将样品通
大学再生医学科学研究所提供;免疫用/小过上样环加入亲和柱后,将流速调至./,继
鼠,中国军事医学科学研究院提供。续用/.磷酸钠盐缓冲液平衡;然后
. /小鼠的免疫小鼠免疫按常规方法用/.柠檬酸钠盐缓冲液洗脱结合在
进行,初次免疫用一的稀释液柱子上的抗体;设定峰收集样品,一℃冰箱保存
与等体积的免疫用完全弗氏佐剂的混合物后腹腔注备用。
射免疫/雌性小鼠;第—次免疫以不完全.. 单克隆抗体亚类的鉴定采用公司
弗氏佐剂乳化的一为免疫原,第次用的免疫球蛋白标准亚类鉴定试剂盒对本次制备的单
.作为免疫原。