下载此文档

目的基因的连接、转化、涂板培养刘玥.ppt

文档分类：行业资料 | 页数：约32页举报非法文档有奖

1/32

下载提示

1.该资料是网友上传的，本站提供全文预览，预览什么样，下载就什么样。
2.下载该文档所得收入归上传者、原创者。
3.下载的文档，不会出现我们的网址水印。

同意并开始全文预览

(约 1-6 秒)

1/32 下载此文档

文档列表 文档介绍

目的基因的连接、转化、涂板培养生物化学与分子生物学教研室刘玥掌握目的基因的重组连接原理及方法。理解蓝白斑筛选鉴定的原理熟悉重组DNA分子转化受体细胞的基本思路和方法目的实验总设计分---PCR分离目的基因切接---目的基因与载体相连转---转入宿主细胞筛---筛选阳性重组体接---目的基因与载体相连原理:DNA聚合酶反应时都有在PCR产物的3’末端添加一个或者几个A碱基的特性利用T载体3’末端的T碱基和PCR产物的A碱基互补配对,经连接酶作用,完成与载体的连接是一种高效克隆PCR产物(TACloning)的专用载体。由pUC18载体改建而成,在pUC18载体的多克隆位点处的XbaI和SalI识别位点之间插入了EcoRV识别位点,用EcoRV进行酶切反应后,再在两侧的3'端添加“T”而成。pMDTM18-TVectorpMDTM18-TVector仪器与主要试剂:pMDTM18-TVector(TaKaRa公司)PCR扩增产物T4DNA连接酶10×T4DNA连接酶缓冲液反应体系pMDTM18-TVector连接试剂盒使用说明(TaKaRa公司)① ②pMDTM18- 5μl 5μl总体积10μl10μl16℃反应30-60分钟感受态细胞感受态细胞:经过电击、CaCl2、RuCl等化学试剂处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA分子通过时细胞的状态。转---转入宿主细胞

目的基因的连接、转化、涂板培养刘玥来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.

目的基因的连接、转化、涂板培养刘玥.ppt

目的基因的连接转化涂板培养刘

目的基因的连接、转化、涂板培养

目的基因的连接、转化、涂板培养刘玥

目的基因的连接、转化、涂板培养

目的基因的连接、转化、涂板培养-liu

目的基因的连接、转化、涂板培养-liu

目的基因的连接、转化、涂板培养-刘玥

目的基因的连接与转化

目的基因的连接、转化、涂板培养-liu

目的基因的连接、转化、涂板培养-liu

目的基因的连接、转化、涂板培养 刘玥.ppt

目的基因的连接、转化、涂板培养刘玥.ppt