HPLC分析在中药分析中的应用 论文.doc

HPLC分析在中药分析中的应用
摘要:HPLC是一种非常有效并普遍实用的中药分析方法,可用于高分子、极性、离子和热不稳定化合物的分离分析。在中药的定性、定量和杂质检测等方面都发挥了重要的作用,该文综述了高效液相色谱技术在中药材定性、定量分析中的应用。
关键词:高效液相色谱法沙罗子金银花
一、HPLC法测定金银花不同部位中木犀草素的含量
金银花是我国传统中药,为忍冬科忍冬属植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)的干燥花蕾或待初开的花。其味甘,性寒,具有清热解毒、疏散风热,疏利咽喉、消暑除烦的作用,可治疗暑热症、泻痢、流感、疮疖肿毒、急慢性扁桃体炎、牙周炎等病。金银花主要含有挥发油、有机酸类、黄***类、三萜皂苷类、环烯醚萜、苷类和其他无机元素等有效成分。其中,以木犀草素及木犀草苷为代表的黄***类化合物,具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等多种药理作用而备受关注。本文主要介绍了木犀草素在金银花不同部位中的含量。
1. 材料和方法
仪器和试剂
美国Agilent 1100 型高效液相色谱仪,Agilent 1100 LC化学工作站;超声波提取机(上海思伯明仪器设备有限公司);电子分析天平(北京赛得利斯公司)。
甲醇、乙***(色谱纯,天津四友);石油醚、冰醋酸(分析纯,天津富宇);浓磷酸(分析纯,洛阳昊华);水为二次蒸馏水;木犀草素对照品(上海晶纯实业有限公司);木犀草苷对照品为实验室自制,结构通过UV、IR、NMR等光谱学方法鉴定,纯度经HPLC峰面积归一化法测定大于99%,可做定量分析之用。
实验方法
对照品溶液的配制
mg,用甲醇定容至10 mL 的容量瓶中, mg/mL 的对照品溶液。 um 的滤膜过滤,备用。
mg,用甲醇定容至10 mL 的容量瓶中, mg/mL 的对照品溶液。 um 的滤膜过滤,备用。
供试品溶液的制备
精密称取干燥恒重的金银花4个部位(花、叶、茎的表皮、茎)的样品各5 g,每个平行4份,置索氏提取器中,加入120 mL 的石油醚,浸泡12h,70℃水浴中提取至溶液显无色,挥发干石油醚,之后加入100 mL甲醇,超声提取3次,过滤、浓缩提取液,定容至5 mL
的容量瓶中,即为测定木犀草素的供试品溶液。 um 的滤膜过滤,备用。
精密称取上述4个部位的样品,同样的制备方法,最后浓缩提取液,定容至10 mL 的容量瓶中,即为测定木犀草苷的供试品溶液。 um 的滤膜过滤,备用。
2. 结果
木犀草素的含量测定
色谱条件的选择
色谱柱为Aglient Zorbax SB-C18柱( mm×150 mm,5 um );流动相为甲醇(φ=%)-磷酸溶液(φ=50%); mL/min ;检测波长3500 nm;柱温30℃。在此色谱条件下,木犀草素对照品和金银花4个部位的木犀草素供试品溶液分别进样,金银花、叶和茎的表皮中木犀草素都能达到基线分离,-图5.




线性关系考察