薄层注意事项.ppt

薄层注意事项理想的色谱分离及准确的定量结果的前提是:-----色谱条件标准化-----操作技术规范化。主要存在问题:薄层板点样展开、展开室展开剂显色一、薄层板注意:无论使用手工铺板还是商品板,薄层板都应均匀、并到达试验要求的分离度。二、点样点样前检查完薄层板后,决定用点状点样(鉴别、检查)还是条带状点样(含量测定)。点样后必须将溶剂全部除去后再进行展开,但要避免高温加热,以免改变待测成分的性质。点样量过多会造成原点“超载”,展开剂产生“绕行”现象使斑点拖尾或重叠,使扫描峰形不对称或不能基线分离,并由于超载导致非线型的校正曲线,严重影响定量结果,降低准确度。注意:鉴别样溶解后,放入安瓿瓶中而不要放在蒸发皿中。点样时必须注意勿损伤薄层表面。点样斑点干燥后再展开。样品的粘度要低,否则易扩散。鉴别分不清斑点,可在样中加标再点一点。工作时的点样位置经典薄层高效薄层原点直径<=5mm1~~15cm5~7cm点点之间距离1~、展开、展开室要注意展开室的---相对湿度不同,分离效果不同。---展开室预饱和,防止边缘效应。另一种方法是板子未点样端放入展开剂中后迅速拿出再放入。---温度:有时温度降低,改善分离效果。---展距:过长,斑点扩散;过短,分离效果不好。---展开缸应相对应。10*20的板就用10*20的展开缸,---展开缸盖不宜凡士林,应为毛玻璃盖密封加重物。控制相对湿度硫酸配制表相对湿度%硫酸ml水ml721375006516950047250500422865003233950018500472145003959500300四、展开剂注意每次展开时临用现配展开剂小比例展开剂用移液管准确加入展开剂中有氨水时,如展开效果不好,应考虑氨水易挥发,用未开封的氨水重新配制展开剂。五、显色喷雾显色:注意雾滴均匀。浸渍显色使用CAMAG的浸板器,需要设定浸板器抽出的速度和规定在显色剂中停留的时间。采用这种方法显色,由于浸渍条件可以精确地标准化,并且薄层各部位可以均匀地接触显色剂,,因此对改善定量时的重现性极为有利,此外对环境保护也优于喷雾法,故常采用。浸完的板,要立刻小心擦干背面玻璃上残留的溶液后平放于通风橱中晾干后再加热。