犬血栓素B2TXB2酶联免疫分析ELISA.doc

犬血栓素B2TXB2酶联免疫分析ELISA.doc:..犬血栓素B2(TXB2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测狗血清,血浆及相关液体样本中血栓素B2CTXB2)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬血栓素B2(TXB2)水平。用纯化的犬血栓素B2(TXB2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血栓素B2(TXB2),再与HRP标记的血栓素B2(TXB2)抗体结合,形成抗体■抗原■酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血栓素B2(TXB2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(0D值),通过标准曲线计算样品中犬血栓素B2(TXB2)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1X481X9628C保存标准品:2700ng/・8°C保存酶标试剂3mlXl瓶6mlXl瓶2・8°C保存样品稀释液3mlXl瓶6mix1瓶28C保存显色剂A液3mlXl瓶6mlXl瓶2・8°C保存显色剂B液3mlXl瓶6mix1瓶28C保存终止液3mlXl瓶6mlXl瓶2・8°C保存浓缩洗涤液(20mlX20倍)XI瓶(20mlX30倍)XI瓶28C保存注意事项:・30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋屮保存。,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本0D值大于标准品孔第一孔的0D值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(XnX5)。,以避免交叉污染。。,,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。。,以英文说明书为准。样本处理及要求::室温血液自然凝固10・20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10・20分钟后,离心20分钟左右(2000・3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000・3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。:检测分泌性的成份吋,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(-)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。