课题2　月季的花药培养.doc

《植物的组织培养技术》知识梳理张建尚江苏省赣榆高级中学一、(1)原理:植物细胞的全能性。(2)过程特别提醒:①植物细胞具有全能的原因:生物的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成完整个体所必需的全部基因。②植物细胞表现出全能性的条件:脱离母体;一定的营养物质和植物激素;无菌和适宜的外界条件。(1)选材:一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。常用MS培养基。主要成分培养基大量元素:N、P、K、Ga、Mg、S。微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。有机物:甘氨酸、盐酸、肌醇、维生素、蔗糖等。植物激素:细胞分裂素和生长素等。(2)营养供应(3)影响因素①培养材料:材料本身的种类、年龄、保存时间长短等。②微生物:对材料用具进行消毒和灭菌。③pH:。④温度:控制在18~22℃.⑤光照:每日日光灯照射12h。⑥植物激素:使用顺序不同,实验结果不同:用量的比例不同,实验结果不同。特别提醒:①不同的植物组织,培养的难易程度差别很大,容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养;同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。②培养基上有细菌等微生物存在时,它们比植物细胞生长、繁殖得更快,而且它们会产生***,使培养的植物细胞很快中毒死亡,因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。:配制各种母液→配制培养基→高压蒸汽灭菌。外植体消毒:70%酒精消毒→无菌水清洗→%***化***溶液消毒→无菌水清洗。接种与培养:工作台消毒→酒精灯旁打开锥形瓶→瓶口旋转通过火焰→将菊花茎段插入培养基中→将封口膜扎好→在18~22℃的无菌箱中培养,每日日光灯光照12h。移栽与栽培:打开培养瓶封口膜培养试管苗几日→流水清洗根部的培养基→将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩环境下生长→幼苗长壮后移栽到土壤中。特别提醒:①熔化琼脂时要不断搅拌,防止琼脂发生焦糊现象。②消毒时既要考虑药剂的消毒效果,又要考虑植物的耐受能力。③接种时要始终在酒精灯火焰旁进行,对接种工具要用火焰灼烧灭菌。④将菊花茎段插入培养基中。时注意不要倒插。二、→小孢子四分体时期→单核居中期→单核靠边期→双核期(花粉粒)特别提醒:①一个小孢子母细胞形成四个花粉粒。②双核期花粉含有一个营养细胞和一个生殖细胞,生殖细胞将再分裂一次形成两个精子。:两种途径主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。(1)材料的选择:从花药来看,应当选择初花期的花药;从花粉来看,应当选择单核期的花粉;从花蕾来看,应当选择完全未开放的花蕾。(2)培养基的组成(3)材料的低温预处理(4)接种密度特别提醒:应选择花粉发育过程中的单核期细胞核移向一侧的时期,单核期以前的花药,质地幼嫩,极易破碎,单核期以后的花药,花瓣已有些松动,给材料的消毒带来困难。盛开的或略微开放的花,都不宜选作实验材料。