基因治疗生物化学.ppt

一、,改善症状镰型细胞贫血症---用5-氮胞苷抑制***化酶,使因***化而关闭的γ基因重新开放,产生HbF代替HbA用反义RNA抑制基因表达核酶(ribozyme)切割RNA阻断基因表达肿瘤治疗,在基因水平抑制肿瘤细胞基因恶性表达和引导肿瘤细胞逆转。1基因治疗的类型(续)—正常基因导入患者体内补偿缺陷基因功能基因替换—以正常基因取代变异基因基因校正—体外对异常基因进行纠正。2基因治疗的类型(续)按矫正基因的类型分为两种基因治疗:·生殖细胞基因治疗—对生殖细胞或早期胚胎细胞进行基因矫正。·体细胞基因治疗—以体细胞为受体细胞,不影响下一代常用细胞介导法:选择靶细胞在体外进行基因修饰,再将其输入体内。3基因置换(genereplacement)定义:将特定目的基因导入特定细胞,通过定位重组,导入的正常基因,以置换基因组内原有的缺陷基因。目的:将缺陷基因的异常序列进行桥正。对缺陷基因的缺陷部位进行精确的原位修复,不涉及基因组的任何改变。4定向整合的条件:转导基因的载体与基因组DNA具有相同的序列。带有目的基因的载体就能找到同源重组的位点,进行部分基因序列的交换。基因同源重组技术又称为基因打靶(argeting)细胞内基因同源重组的发生率很低。基因同源重组技术5基因增补(geneaugmentation)定义:通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。类型:有缺陷基因细胞中导入正常基因,而细胞内的缺陷基因并未除去,通过导入正常基因的表达产物,补偿缺陷基因的功能;向靶细胞中导入靶细胞本来不表达的基因,利用其表达产物达到治疗疾病的目的。6基因干预(geneinterference)基因失活定义:采用特定的方式抑制某个基因的表达,或者通过破坏某个基因的结构而使之不能表达,以达到治疗疾病的目的。7(一)反义RNA(antisenseRNA),通常采用的方法有两种:(1)体外合成反义RNA,直接作用于培养细胞,细胞吸收RNA后,发挥作用。(2)构建一些能转录反义RNA的重组质粒,将这些质粒转入细胞中,转录出反义RNA而发挥作用。8反义RNA技转移术①受体介导的RNA转移十分专一,而且效率高;②被转移的RNA是被保护的,与周围环境之间存在多聚赖氨酸的保护层,可以抵抗环境中的核酸酶的降解作用。借助前述的受体介导基因转移方法,可以实现受体介导的反义RNA转移。9反义RNA的优点受体介导的反义RNA基因治疗有其自身的优点,而在一定程度上补充了转基因治疗的不足。(l)安全性高(2)反义RNA设计和制备方便(3)具有剂量调节效应(4)能直接作用于一些RNA病毒10