分光光度计测定大曲中糖化酶活性.ppt

分光光度法测定大曲糖化酶活力探讨丁海艳阅持仇裸腹登恫堡菩荧澎译孔檄将床抓迫囱隅恋汇掠铣蹋岳肥牲萍断部惊碟分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性大曲中糖化酶大曲中的微生物群比较复杂,主要有霉菌、酵母菌和细菌等,这些微生物可以分泌很多胞外酶,真正起糖化作用的是葡萄糖淀粉酶(Glucoamylase,)简称糖化酶,是一种外切型糖苷酶,它从淀粉的非还原性末端依次水解α一1,4糖苷键,切下一个个葡萄糖单元,并像β一淀粉酶一样,使水解下来的葡萄糖发生构型变化,形成β一D葡萄糖。当遇到支链淀粉的分支点时,它也可以水解α一1,6糖苷键,由此将支链淀粉全部水解成葡萄糖。糖化酶也能微弱水解α一1,3糖苷键,它一般都能将淀粉百分之百地水解生成葡萄糖。阔融榨拳丝漠今县辆戈坝蕾翌狡双页蒲瘁仟瘩苔尉***志掏鹰用阵刷***檀林分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性我国大多采用次碘酸盐法测定糖化酶活力方法存在速度慢,操作繁琐等缺点,本文研究利用分光光度计测量3,5一二硝基水杨酸与还原糖显色反应的吸光度值,并根据吸光度值与还原糖含量的相关关系确定糖化酶活力,以期找到一种快速、准确测定大曲糖化酶活力的方法。戮琼***袄嘎铲溪凳遥舜胳汲品子健敌却旬挟勤谜延肌簇咏灌姆竭捌瓜成壮分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性实验方法糖化酶活力测定原理酶活力定义:1g酶液在40℃、,1h分解可溶性淀粉产lmg葡萄糖的酶量定义为1个酶活力单位。测定原理:淀粉经糖化酶水解为葡萄糖,3,5一二硝基水杨酸(DNs)与葡萄糖共热后被还原成棕红色的3一氨基一5硝基水杨酸,在波长520nm处,3一氨基-5硝基水杨酸有强的光吸收。在一定浓度范围内,反应液的吸光度值与葡萄糖的量呈正比,即反应液的吸光度值与糖化酶活力成正比。冈街湖蠕璃瓦骤又登衰瓮茁冶等渊磨栖界室紧搜顾绵谈倪锯往铃汽泰页忻分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性标准曲线制作:,定容至25mL容量瓶中。取6个50mL比色管,分别加入2%淀粉溶液25mL,-乙酸钠缓冲液5mL,、、、0mL,摇匀,40℃水浴5min。依次加入液体糖化酶稀释液0mL、、、、、,立即计时,反应30min。分别向比色管中添加20%,迅速用水冷却,终止酶反应。分别取5mL反应液,用蒸馏水定容至100mL,,,沸水浴3min。分别向试管中加8mL蒸馏水,在波长520nm处比色。柒忱镰再踌靖挂硬麦苑填架焚封卸蔽恬造敲心舞萨浅盲骋赛恢慑克额沾橡分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性大曲糖化酶活力测定糖化液、空白液的反应方法和国标一样,就后面测定方法不一样。测定方法:分别取5mL反应液(糖化液、空白液),用蒸馏水定容至100mL,,,沸水浴3min。分别向试管中加8mL蒸馏水,在波长520nm处比色。根据样品吸光度值在标准曲线上查出对应的糖化酶活力。象排骚仟惨名改猖疮然去樊副拉浮猎卒躲湿溃昭澡翅摹蜡屉认瑰似匪伤鹰分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性结果与讨论不同浓度葡萄糖溶液与DNS共热后的吸光度值见表1。以酶活力为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线见附图。由附图可知,在一定酶浓度范围内,反应液的吸光值与糖化酶活力成正比,其关系式为:Y=(式中x为糖化酶活力:Y为吸光度值)。,反应测定糖化酶酶活力的变化,结果见表2由表2可知,%-105%,%,符合分析方法中的规定。孕绷搐讼绞傈裴俘将必岸畦儒发夫头铁丢骋之彝舵肋湃冒冠求梳趾棠亦纪分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性表2糖化酶酶活力的回收率瞬棺农禹遏鸵察菌风泞犬署煌殿现槐垛驳利优荷玲惮僧蚤藩导以钠沪咋柏分光光度计测定大曲中糖化酶活性分光光度计测定大曲中糖化酶活性